应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量中阴性能跑出CQ为31的值，怎么回事啊，要疯了 ，跪求战友们帮助呀。
101/1返回列表
查看: 7097  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

美琪琪

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量中阴性能跑出CQ为31的值，怎么回事啊，要疯了 ，跪求战友们帮助呀。 已有6人参与

跑荧光定量时，用灭菌水做的模板，跑了3次阴性对照，结果CQ值均为31点几；后面又用该引物跑其他病毒，没有扩增曲线，后面换了染料、灭菌水、重新稀释的引物、结果阴性还是跑出了扩增曲线，为什么会这样了？求解？荧光定量中阴性能跑出CQ为31的值，怎么回事啊，要疯了 ，跪求战友们帮助呀。
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : OZOQ%QUW$LZZ03AJ5WH415I.png
    • 2015-02-09 18:35:37, 14.69 K

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

QPCR 问题简答 高通量测序

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-02-09 18:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
美琪琪(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-13 20:57:01
阴性对照有扩增是气溶胶污染吧。
你分开跑好难分辨，你要在跑其他病毒情况下，没有扩增曲线?那就说不通。
你设置一个实验，让其他病毒与你要做的病毒一起跑一次（程序一样吧？），设置多几个阴性对照，看看情况。
赞一下 回复此楼
2楼2015-02-10 09:10:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a314919473

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
美琪琪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-13 20:57:10
气溶胶真的很难对付，可以在A实验室稀释模板，在B实验室配制体系、加样，在C实验室上机，实验结束后使用紫外照射30min-2h是有好处的。
赞一下 回复此楼
有你真好
3楼2015-02-11 11:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-02-13 20:57:23
应该不是试剂污染造成的  是超净工作台上的气溶胶污染！我遇到这样情况是这样解决的：1.SYBR GREEN的试剂专门放在一个盒子里，每次使用都戴手套 和引物分开放。2.使用超净工作台前 都会使用酒精和大量水喷洗工作台，并且使用干净的一次性棉布搽干净。自然晾干 3.配置体系在一个房间，加样在一个房间 反正会导致交叉污染的地方都分开操作 最后跑完的QPCR产物有多远扔多远 反正不要和你操作的房间在一起  我一般直接扔在比较远的试剂垃圾桶。祝好运（手打 不容易 ）
赞一下(1人) 回复此楼
生命不息奋斗不止
4楼2015-02-12 19:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
美琪琪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-02-13 20:57:35
实验室污染了，换个房间你做，或者用去DNA的试剂擦拭台面，抢，换TIP等，应该可以了
赞一下 回复此楼
5楼2015-02-13 14:31:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JNVBNC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

SYBR Green吗？跑Melt curve了吗？你的模板病毒是总RNA吗？从什么材料中提取的？
赞一下 回复此楼
6楼2015-02-17 22:52:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

美琪琪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2015-02-10 09:10:43
阴性对照有扩增是气溶胶污染吧。
你分开跑好难分辨，你要在跑其他病毒情况下，没有扩增曲线?那就说不通。
你设置一个实验，让其他病毒与你要做的病毒一起跑一次（程序一样吧？），设置多几个阴性对照，看看情况。

首先抱歉啊，年前一直忙于写文章所以好久没逛这个论坛了，是这样的我年前用其他病毒和水做的阴性对照，但其他病毒没有跑出扩增曲线，但是用水作的阴性且有，但是年后我又重新跑了一次，结果用年前跑阴性对照的病毒也跑出了CQ值，当然了水作的阴性也有。怎么个情况了。谢谢了
赞一下 回复此楼
7楼2015-03-06 23:43:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

美琪琪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by a314919473 at 2015-02-11 11:06:28
气溶胶真的很难对付，可以在A实验室稀释模板，在B实验室配制体系、加样，在C实验室上机，实验结束后使用紫外照射30min-2h是有好处的。

关于气溶胶我也考虑到了，但是我每次用水作的阴性对照CQ值为31点几，我可不可以就把这个值作为一个阴性的临界点了？我总共跑了10次用水作的对照，几乎和这个值相近。
赞一下 回复此楼
8楼2015-03-06 23:47:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

美琪琪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by JNVBNC at 2015-02-17 22:52:53
SYBR Green吗？跑Melt curve了吗？你的模板病毒是总RNA吗？从什么材料中提取的？

是这个染料，跑了的，我的模板是病毒中的一个基因而已，从尿囊液中提取的病毒，然后做的标准质粒。
赞一下 回复此楼
9楼2015-03-06 23:57:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小佳佳佳佳

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好，请问下这个问题你是怎么解决的。向您请教下。
赞一下 回复此楼
10楼2016-03-02 10:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 美琪琪 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 6/300 2026-03-23 11:03 by laoshidan
[考研] 291 求调剂 +4 化工2026届毕业� 2026-03-21 4/200 2026-03-23 09:59 by bingchuan
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5 ￣^￣゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 材料专业求调剂 +6 hanamiko 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:24 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭