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huangsz997

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于农杆菌侵染过程共培养及筛选的细节问题 已有2人参与

最近在做农杆菌侵染水稻愈伤的实验,流程很熟但具体细节却无人可问。比如,1.在共培养(PH5.5)之前,用农杆菌侵染(PH5.5)愈伤后,愈伤需要吹干在放到共培养基上,每次都担心吹干时间过长会不会愈伤就挂了?但时间短又怕在共培养基上长菌过多。2.我共培养3天(28℃,暗培)后一般都是农杆菌会把愈伤长满,这种状态对吗?3.用清水和500mg/L羧苄青霉素洗到什么程度合适?有时,我在筛选培养基(PH5.8)上发现愈伤油亮,感觉又有了农杆菌,是不是不应该在筛选培养基上还看到农杆菌?
有没有前辈在这些细节及实验流程上给一些参考(最好是细节解释清楚,protocol也行啊),万分感谢!!!
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虫子大军

新虫 (初入文坛)

4楼2016-12-27 08:44:46
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896303089

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你可以放滤纸上吹干,再放到到共培上,一般不会长菌,像你说的那种情况肯定是不正常的
2楼2015-02-12 14:05:28
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chengqw

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

没事,胚性愈伤组织没那么容易死的,吹2个小时都没事;另外,看到有菌癍出现就及时转接除菌,不要等菌癍长大。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-02-14 07:56:21
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