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让心去散步

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】我农杆菌侵染后的水稻愈伤,为啥不分化了啊~~~已有8人参与

我是用农杆菌法转的,可是愈伤组织在侵染后,共培养3天,抑菌一周,然后分化,先用清水洗至澄清,再用抗生素水洗一次,浸泡约1-2min,激素浓度是6-BA:2mg/L,NAA浓度是0.2mg/L(0.5mg/L的也不分化),但就是不分化,也不怎么褐化,农杆菌长的也不多,请高手们指点啊~~~再不分化我就不能毕业了。。。
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zjx4700

木虫 (小有名气)

你换个激素试试,KT,ZT什么的  我同学做的用玉米素挺好使
油菜农业家!
2楼2011-03-19 18:32:19
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zjx4700

木虫 (小有名气)

不过不是小麦  但也是禾本科的一种草
油菜农业家!
3楼2011-03-19 18:32:46
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fengling821

木虫 (著名写手)

很可能是你的的愈伤不好

建议你灭菌滤纸 然后用无菌滤纸干燥一下愈伤

再继代到新的分化培养基中
4楼2011-03-21 20:52:27
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lxjwishes

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
分化不要加NAA吧,直接6BA或者再加点KT试试看
pleasemywings,flymeaway.
5楼2011-03-22 09:44:06
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419249049

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
4楼说的不错,你可以试试不加激素,或是只加细胞分裂素就好,还要再用你上面说的那种做法作为对照,试一遍,愿你成功!
最近老是被老板批,c58c1侵染桉树叶片就是染不上色,前期的侵染工作,染色液,菌种都没问题,共培养了2天,就是染不上色,郁闷死了!还被老板狠批了一顿,气死了!
6楼2011-03-22 12:56:51
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fzbxxw

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
赞同很可能是愈伤组织不好。
7楼2011-04-02 10:41:22
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WING无忧

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jhu132llh(金币+4): 鼓励新虫积极参与讨论,今天很活跃 2011-07-21 16:53:10
这个跟愈伤生长时间和状况也是有关系的,我们都是要先摸索生长多久的愈伤比较适合做
8楼2011-07-21 12:22:26
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A406

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jhu132llh(金币+2): 鼓励交流 2011-10-27 17:42:40
只筛选一周就能得到抗性愈伤吗?实验流程有问题吧?
9楼2011-10-27 11:17:35
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charchy

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jhu132llh(金币+2): good,感谢积极应助 2011-10-30 18:17:10
不是共培养三天后就洗的吗?之后的实验不需要洗吧,这样会把刚长出的抗性愈伤颗粒冲洗掉的。所以你之后的抗性愈伤应该很少,看不到分化也就正常了。很久没做了,可能说得不对。呵呵
10楼2011-10-29 13:04:31
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