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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC测两种标准品保留时间完全重合怎么回事
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寒露携阳

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC测两种标准品保留时间完全重合怎么回事 已有1人参与

用的C18的柱子，20%的乙腈做溶剂，两种标准品一个鬼臼毒素，另一个是4'-去甲基鬼臼毒素，27%乙腈做流动相等度洗脱，出峰时间完全重合，是怎么回事呢？之前做过用甲醇作溶剂，其它条件不变，保留时间相差9min左右，这次换了一个液相机子，用甲醇溶解结果很不好，改用20%乙腈作溶剂，效果好些，就是无法分离，怎么回事呢？另标准品买了5年了，是标准品降解了么？还是怎么回事呢？求大侠们指点一下，万分感激~
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人生在世，有所不为，有所必为！
1楼 2015-02-03 11:04:41
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
楼上所言极是。另外，你可以用梯度洗脱，在一定程度上可以降低溶剂的影响。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
3楼2015-02-03 12:17:12
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
寒露携阳: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-03-03 18:37:59
在不同溶剂里有不同的选择性是可能的。既然你以前用甲醇做过，效果也不错，我建议还是用甲醇。你说效果不好，到底是怎么个不好法？

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2楼2015-02-03 11:11:03
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寒露携阳

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-03 11:11:03
在不同溶剂里有不同的选择性是可能的。既然你以前用甲醇做过，效果也不错，我建议还是用甲醇。你说效果不好，到底是怎么个不好法？

峰形不好，前伸很严重，而且两个标品出峰时间也是几乎相同。
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人生在世，有所不为，有所必为！
4楼2015-02-03 14:45:02
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 寒露携阳 at 2015-02-02 18:45:02
峰形不好，前伸很严重，而且两个标品出峰时间也是几乎相同。...

以前它们的峰差9分钟，现在几乎重合，那么首先应该确认柱子本身是否还能用。试试打一针测柱效的标样。

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5楼2015-02-03 22:28:40
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