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寒露携阳

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC测两种标准品保留时间完全重合怎么回事 已有1人参与

用的C18的柱子,20%的乙腈做溶剂,两种标准品一个鬼臼毒素,另一个是4'-去甲基鬼臼毒素,27%乙腈做流动相等度洗脱,出峰时间完全重合,是怎么回事呢?之前做过用甲醇作溶剂,其它条件不变,保留时间相差9min左右,这次换了一个液相机子,用甲醇溶解结果很不好,改用20%乙腈作溶剂,效果好些,就是无法分离,怎么回事呢?另标准品买了5年了,是标准品降解了么?还是怎么回事呢?求大侠们指点一下,万分感激~
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人生在世,有所不为,有所必为!
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
寒露携阳: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-03-03 18:37:59
在不同溶剂里有不同的选择性是可能的。既然你以前用甲醇做过,效果也不错,我建议还是用甲醇。你说效果不好,到底是怎么个不好法?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-02-03 11:11:03
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

楼上所言极是。另外,你可以用梯度洗脱,在一定程度上可以降低溶剂的影响。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
3楼2015-02-03 12:17:12
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寒露携阳

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by superyeast at 2015-02-03 11:11:03
在不同溶剂里有不同的选择性是可能的。既然你以前用甲醇做过,效果也不错,我建议还是用甲醇。你说效果不好,到底是怎么个不好法?

峰形不好,前伸很严重,而且两个标品出峰时间也是几乎相同。
人生在世,有所不为,有所必为!
4楼2015-02-03 14:45:02
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 寒露携阳 at 2015-02-02 18:45:02
峰形不好,前伸很严重,而且两个标品出峰时间也是几乎相同。...

以前它们的峰差9分钟,现在几乎重合,那么首先应该确认柱子本身是否还能用。试试打一针测柱效的标样。

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-02-03 22:28:40
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