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西北射天狼

新虫 (初入文坛)

[交流] 肌原纤维提取的问题 已有3人参与

各位好,请教个问题。肌原纤维蛋白是离心后得到的白色沉淀物。那么在测酶活时,用到的3mg/L的肌原纤维蛋白溶液是怎么制备的呢。纯水溶解还是多大浓度的NaCl溶解制备,ph多少?感觉盐溶液并会不会完全溶解的,会有沉淀吧。
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西北射天狼

新虫 (初入文坛)

我大概明白了,0.1M氯化钠,4%的溶解还是能达到的。也就是40mg/ml
2楼2015-01-29 21:32:12
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99503102

版主 (著名写手)

明白就好
微信公众号:食安小屋
3楼2015-01-29 22:06:13
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西北射天狼

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 99503102 at 2015-01-29 22:06:13
明白就好

今天做了下,发现0.6M的氯化钠都溶解不了肌原纤维啊,不用管吗?怎么回事呢
4楼2015-01-30 22:15:19
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robertno

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用磷缓提的还是Tris-Hcl ?个人感觉可以用纯水稀释,也一直这么做。3 mg/L的肌原纤维蛋白溶夜么……先测测提出来的蛋白浓度,然后就可以稀释了啊。话说哦你这肌原纤维蛋白为啥是白色沉淀物,不知道你是怎么提的。
5楼2015-01-31 21:31:45
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西北射天狼

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by robertno at 2015-01-31 21:31:45
用磷缓提的还是Tris-Hcl ?个人感觉可以用纯水稀释,也一直这么做。3 mg/L的肌原纤维蛋白溶夜么……先测测提出来的蛋白浓度,然后就可以稀释了啊。话说哦你这肌原纤维蛋白为啥是白色沉淀物,不知道你是怎么提的。

我是磷酸盐提的。0.1M的上清弃后剩余沉淀不就是白色沉淀物吗,这个就是肌原纤维蛋白吧。问题是无法将沉淀溶解掉更别提测蛋白浓度了
6楼2015-03-23 20:19:37
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一念执着00

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 西北射天狼 at 2015-03-23 20:19:37
我是磷酸盐提的。0.1M的上清弃后剩余沉淀不就是白色沉淀物吗,这个就是肌原纤维蛋白吧。问题是无法将沉淀溶解掉更别提测蛋白浓度了...

加入0.5M氯化钠的PBS缓冲液 应该可以溶解肌原纤维蛋白了肌原纤维蛋白是盐溶性蛋白
7楼2015-04-01 15:04:54
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