[求助] 求助大家Elisa实验问题~ 已有3人参与

我在进行Elisa实验的初步摸索阶段，以前从来没有接触过相关实验，也没有很系统的学习过 希望各位大神们能帮帮忙！先谢过~~~ 前言：1.我使用的是双抗夹心法，由于没有两个不同位点的单抗，故选择的是一个单抗一个多抗；          2.同时没有自己制作酶标抗体，而是采用  抗体（兔源）-抗原-抗体（鼠源）-酶标羊抗鼠   来检测；          3.检测过程中，先用已知浓度的标准纯抗原来制作曲线，用Logistic曲线拟合2（四参数）算法拟合曲线，R方都在0.999以上，我认识的一个之前做过抗体的人说结果很好（我不太懂）；          4.抗原为细菌中表达的蛋白，需要检测的是转到植物中表达的该抗原； 现遇到的问题如下：          1. 我用纯抗原来做曲线是一个Logistic曲线拟合2（四参数）的曲线，不是直线，需要用ElisaCalc这个软件来计算，这样的结果对么？          2. 用纯抗原做好曲线后，检测植物蛋白检测不出来（已用商品化试剂盒测试确定提取物中含有转入的蛋白）检测抗原蛋白却能检测出来（平行操作）是为什么呢？正反包被都测试过（即包被多抗+抗原+单抗+抗单抗酶标二抗；包被单抗+抗原+多抗+抗多抗酶标二抗），抗原可以检测出来，含抗原的植物提取物却检不出来；直接包被植物提取物+单抗/多抗+相应酶标二抗检测，结果很怪异，阴阳性全部一样深。。。（整个人都不好了。。。）          PS：木有条件购买其他抗体，只有一个多抗和一个单抗，单独验证过单抗、多抗均可以与抗原反应 请教大神们这个怎么解~小女子真的想不出来了~跪谢！！！

回复此楼

» 猜你喜欢

• 不自信的我 已经有5人回复
• 磺酰氟产物，毕不了业了！ 已经有4人回复
• 论文终于录用啦！满足毕业条件了 已经有16人回复
• 投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球 已经有8人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

• 我做的Elisa，请大家分析一下为什么会出现这样的结果 已经有7人回复
• 求助一个实验步骤 已经有6人回复
• 小鼠ELISA和流式细胞实验问题求助 已经有8人回复
• ELISA试验不显色，希望得到大家帮助 已经有41人回复
• Elisa 实验时实验组的OD值范围一般是多少的 已经有3人回复
• Elisa试验判断阴性阳性的问题 已经有4人回复
• ELISA实验中，抗原和抗体的稀释液问题 已经有3人回复
• ELISA结果分析 已经有13人回复
• 有关ELISA中PBS的浓度 已经有10人回复
• ELISA实验结果求助 已经有7人回复
• 求助Elisa实验捕获后的洗脱问题 已经有4人回复
• elisa洗板问题 已经有8人回复
• 关于ELISA实验 已经有4人回复
• 关于Elisa实验中吸光度值衰减的问题 已经有8人回复
• ELISA中包被抗原的问题 已经有8人回复
• 【求助/交流】ELISA检测试剂盒检测范围对实验结果影响！ 已经有3人回复
• 【求助/交流】关于ELISA中，使用封闭蛋白的问题 已经有8人回复
• 【求助/交流】ELIsa间接法中，如何提高阳性值？ 已经有13人回复
• 【求助/交流】关于ELISA实验，用biotin直接包被可以吗？ 已经有6人回复
• 【求助/交流】请问elisa实验组和对照组都显色怎么解决？ 已经有6人回复
• ELISA实验问题请教 已经有5人回复