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草摩由希

新虫 (小有名气)

[求助] 两条体外合成的单链DNA,从5到3,序列是完全互补的。。。 已有3人参与

两条体外合成的单链DNA,从5到3,序列是完全互补的。。。但是有人跟我说两个5端是不能结合的,我觉得体外是可以的。。。求大神赐教
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xuzhu598

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
体外退火是可以的,不知接下来你要做什么?如果构建质粒的话应该不行
2楼2014-12-27 21:22:22
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一条是5到3,互补的那条要3到5才行

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-12-28 10:17:37
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
只要是反向互补的就可以,在体外退火就可以的,可以将二者等摩尔比混合,75℃处理5 min,之后用10 min左右降到室温,这个过程可以使用PCR仪中的touchdown程序完成,我在体外合成双链RNA就是这样做的,双链DNA应该也差不多。
没有做不到,只有想不到!
4楼2014-12-28 14:39:21
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