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mayingyi

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[求助] 关于两条DNA单链杂交技术

想选择两条互补的DNA单链进行杂交实验，想请教一下在选择两条DNA单链时应该注意的问题？以及在进行杂交实验过程中应注意的问题？最好说的详细点。

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昨天终会过去，今天就在手里

1楼 2012-02-17 15:18:35

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纸小芋

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励积极应助！ 2012-02-17 18:23:30

是完全互补配对的两条ssDNA就不存在选择的问题了吧，在杂交过程中需要注意杂交温度，一般是比Tm值低15度左右杂交效果就比较好了，当然还有缓冲液的选择，常用的是pH为7.2到7.6左右的Tris、PBS、TE等，当然可以根据你的实际需要加入二价盐离子，或者EDTA等。

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2楼2012-02-17 16:24:58

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mayingyi

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楼: Originally posted by 纸小芋 at 2012-02-17 16:24:58:
是完全互补配对的两条ssDNA就不存在选择的问题了吧，在杂交过程中需要注意杂交温度，一般是比Tm值低15度左右杂交效果就比较好了，当然还有缓冲液的选择，常用的是pH为7.2到7.6左右的Tris、PBS、TE等，当然可以根据 ...

那DNA单链中碱基数以及各种碱基比例之类的选择应注意什么问题呀？

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昨天终会过去，今天就在手里

3楼2012-02-17 16:29:00

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