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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于两条DNA单链杂交技术
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mayingyi

金虫 (正式写手)

[求助] 关于两条DNA单链杂交技术

想选择两条互补的DNA单链进行杂交实验，想请教一下在选择两条DNA单链时应该注意的问题？以及在进行杂交实验过程中应注意的问题？最好说的详细点。
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昨天终会过去，今天就在手里
1楼 2012-02-17 15:18:35
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mayingyi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by 纸小芋 at 2012-02-17 16:24:58:
是完全互补配对的两条ssDNA就不存在选择的问题了吧，在杂交过程中需要注意杂交温度，一般是比Tm值低15度左右杂交效果就比较好了，当然还有缓冲液的选择，常用的是pH为7.2到7.6左右的Tris、PBS、TE等，当然可以根据 ...

那DNA单链中碱基数以及各种碱基比例之类的选择应注意什么问题呀？
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昨天终会过去，今天就在手里
3楼2012-02-17 16:29:00
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纸小芋

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励积极应助！ 2012-02-17 18:23:30
是完全互补配对的两条ssDNA就不存在选择的问题了吧，在杂交过程中需要注意杂交温度，一般是比Tm值低15度左右杂交效果就比较好了，当然还有缓冲液的选择，常用的是pH为7.2到7.6左右的Tris、PBS、TE等，当然可以根据你的实际需要加入二价盐离子，或者EDTA等。
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2楼2012-02-17 16:24:58
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纸小芋

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

mayingyi(金币+10): ★★★很有帮助 2012-02-18 08:37:25
这个看用途不同吧，一般大家常用的做法都是会选择一条现成的dsDNA中的一段，然后分别合成2条ssDNA就可以了啊。但是如果你只是作为连接之类的作用的话，就不必这么麻烦了，可以搞一条全T的，一条全A的就可以了啊！
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4楼2012-02-17 16:42:38
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