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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 两条体外合成的单链DNA，从5到3，序列是完全互补的。。。
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草摩由希

新虫 (小有名气)

[求助] 两条体外合成的单链DNA，从5到3，序列是完全互补的。。。 已有3人参与

两条体外合成的单链DNA，从5到3，序列是完全互补的。。。但是有人跟我说两个5端是不能结合的，我觉得体外是可以的。。。求大神赐教
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1楼 2014-12-27 16:57:30
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xuzhu598

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
体外退火是可以的，不知接下来你要做什么？如果构建质粒的话应该不行
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2楼2014-12-27 21:22:22
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一条是5到3，互补的那条要3到5才行

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2014-12-28 10:17:37
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
只要是反向互补的就可以，在体外退火就可以的，可以将二者等摩尔比混合，75℃处理5 min，之后用10 min左右降到室温，这个过程可以使用PCR仪中的touchdown程序完成，我在体外合成双链RNA就是这样做的，双链DNA应该也差不多。
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没有做不到，只有想不到！
4楼2014-12-28 14:39:21
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