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wanxiagao

金虫 (小有名气)


[交流] 高效液相 测组织中NADH 和NAD

查了文献看组织中测NADH和NAD ,流动相要加离子对试剂有的加四丁基硫酸氢铵,有的加四丁基氢氧化胺,有的加四丁基溴化铵。
想请教三个问题:
1. 分离NADH和NAD ,流动相有不用加离子对就可以分离的配方吗(听说离子对对柱子损伤还是嘛大的)
2.一定要加的话,加任何一种都可以吗(四丁基硫酸氢铵离子对好贵,四丁基溴化铵只看到AR纯度的可以用不)
3.文献上测定前的组织处理用的是1mMEDTA和0.6M高氯酸,这样处理的能同时检测出NADH和NAD
恳请用过高效液相方法测定NADH和NAD
不吝赐教

[ Last edited by wanxiagao on 2014-12-23 at 16:26 ]
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wanxiagao

金虫 (小有名气)


引用回帖:
16楼: Originally posted by archbishop at 2014-12-23 14:49:40
1. 如果你用C18的话就必须加离子对试剂。
2. 按照文献的方法。最好是用色谱纯的。

我查有个文献条件是这样的:
Stable-C18反相柱,流速1.2ml/min,260nm紫外检测,柱温:25,进样量100ul
流动相:80% 10mMKH2PO4(PH7.0)+20%甲醇
滤膜0.22um水相膜(四氟乙烯膜)


请问Stable-C18反相柱和普通的C18反相柱有啥区别哈
19楼2014-12-23 20:11:05
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wanxiagao

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by syhorchid at 2014-12-23 13:12:33

能给点意见吗
5楼2014-12-23 13:38:38
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wanxiagao

金虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by dmbb at 2014-12-23 13:28:23

给点指点吧
6楼2014-12-23 13:39:20
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wanxiagao(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
11楼2014-12-23 13:57:09
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