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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】怎么测微生物的ATP,ADP,AMP

怎么测微生物的ATP,ADP,AMP？我看文献说用萤火虫荧光素酶的生物发光反映测定，但是没有具体步骤，请问有这种试剂盒吗？还是自己买这种酶来测？具体步骤是怎么样的？请帮帮我！谢谢！

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1楼2011-04-01 10:07:52

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沙中清泉

木虫 (正式写手)

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同问

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2楼2011-04-01 14:59:13

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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by 沙中清泉 at 2011-04-01 14:59:13:
同问

谁能帮帮我们啊？

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3楼2011-04-01 15:47:51

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yancao

金虫 (小有名气)

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★
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~ 2011-04-02 14:33:51
sunmaocheng(金币+5): 2011-04-25 15:19:53

用HPLC就可以，流动相拥磷酸缓冲液，C18柱，不过要自己摸一下条件的。

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4楼2011-04-01 16:08:55

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proteinwang

铜虫 (正式写手)

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★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流~~ 2011-04-02 14:33:43
sunmaocheng(金币+3): 2011-04-25 15:20:04

首先提取胞内代谢物，然后用LC-MS检测代谢物和利用标准样品进行定性和定量分析，但是胞内代谢物提取的过程中很容易出现渗漏现象，所以需要摸索条件。
其次，好像有类似的试剂盒，我在文献中见过，但是名字记不起来了，不好意思。

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5楼2011-04-02 08:01:36

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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by yancao at 2011-04-01 16:08:55:
用HPLC就可以，流动相拥磷酸缓冲液，C18柱，不过要自己摸一下条件的。

你好！你用过这种方法吗？

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6楼2011-04-02 10:04:47

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sunmaocheng

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by proteinwang at 2011-04-02 08:01:36:
首先提取胞内代谢物，然后用LC-MS检测代谢物和利用标准样品进行定性和定量分析，但是胞内代谢物提取的过程中很容易出现渗漏现象，所以需要摸索条件。
其次，好像有类似的试剂盒，我在文献中见过，但是名字记不起 ...

LC-ms贵吗？我现在想找比较便宜的方法！

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7楼2011-04-02 10:06:10

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xiuwei001

铁杆木虫 (正式写手)

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★ ★ ★
scelab(金币+3): 高手，谢谢交流 2011-04-03 23:44:48

LC-ms不算贵，100块钱一个样吧，各地价格不等。不用ms也可以，只用adp，atp的变化来测酶活。但是这个方法不是很精确，有硬伤。

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8楼2011-04-03 17:00:43

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tidna

新虫 (初入文坛)

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★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5): 鼓励新虫积极参与交流~~~ 2011-04-05 19:25:51
sunmaocheng(金币+2): 2011-04-06 15:40:48

可以用Sato和Stanley的测定方法，参考一下这两篇文献吧~
Kim W S, Park J H, Tandianus J E, et al. A distinct physiological state of Lactococcus lactis cells that confers survival against a direct and prolonged exposure to severe stresses [J]. FEMS Microbiol Lett, 2002, 212(2): 203-208.
Li Y, Hugenholtz J, Abee T, et al. Glutathione protects Lactococcus lactis against oxidative stress [J]. Appl Environ Microbiol, 2003, 69(10): 5739-5745.

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9楼2011-04-05 16:35:44

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