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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相 测组织中NADH 和NAD
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wanxiagao

金虫 (小有名气)

[交流] 高效液相 测组织中NADH 和NAD

查了文献看组织中测NADH和NAD ，流动相要加离子对试剂有的加四丁基硫酸氢铵，有的加四丁基氢氧化胺，有的加四丁基溴化铵。
想请教三个问题：
1. 分离NADH和NAD ，流动相有不用加离子对就可以分离的配方吗（听说离子对对柱子损伤还是嘛大的）
2.一定要加的话，加任何一种都可以吗（四丁基硫酸氢铵离子对好贵，四丁基溴化铵只看到AR纯度的可以用不）
3.文献上测定前的组织处理用的是1mMEDTA和0.6M高氯酸，这样处理的能同时检测出NADH和NAD
恳请用过高效液相方法测定NADH和NAD
不吝赐教

[ Last edited by wanxiagao on 2014-12-23 at 16:26 ]
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1楼 2014-12-23 13:09:13
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archbishop

禁虫 (职业作家)
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24楼: Originally posted by wanxiagao at 2014-12-23 21:39:55
http://wenku.baidu.com/link?url=-rQJLx92-PWyRe5PDmpRt9cebuQ8agrdqJw5sfjwuY3_lKP5mKgn9e_bsqY5-kBLYIz77EU64VTVngdo2SXy5iRbKdQl0tjZR1baaqnwz8W，这个文档的53-54页，论文本身的42-43页...

确实没查到这种柱子，或许不是很知名的牌子。我觉得应该是他写的不准确，就是安捷伦的StableBond
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25楼2014-12-23 21:51:47
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wanxiagao

金虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by syhorchid at 2014-12-23 13:12:33

能给点意见吗
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5楼2014-12-23 13:38:38
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wanxiagao

金虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by dmbb at 2014-12-23 13:28:23

给点指点吧
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6楼2014-12-23 13:39:20
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匿名

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11楼2014-12-23 13:57:09
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wanxiagao

金虫 (小有名气)
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11楼: Originally posted by lich666 at 2014-12-23 13:57:09
一般这种亲水性很强的都得加这种离子试剂，提高离子强度。个人试过哪种离子试剂影响不大，最后用完一点把柱子立刻冲干净。
C18这样，你可以尝试下别的色谱柱可能有不加离子对的方法，或者打电话问问安捷伦的工程师 ...

我们测试中心只有C18哈
AR级别的四丁基溴化铵可以用不
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15楼2014-12-23 14:14:23
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archbishop

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1. 如果你用C18的话就必须加离子对试剂。
2. 按照文献的方法。最好是用色谱纯的。
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16楼2014-12-23 14:49:40
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wanxiagao

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by archbishop at 2014-12-23 14:49:40
1. 如果你用C18的话就必须加离子对试剂。
2. 按照文献的方法。最好是用色谱纯的。

谢谢哈，加离子对试剂的目的是什么呢
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17楼2014-12-23 15:22:44
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archbishop

禁虫 (职业作家)
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17楼: Originally posted by wanxiagao at 2014-12-23 15:22:44
谢谢哈，加离子对试剂的目的是什么呢...

不谢。让那些本来不保留的物质保留。
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18楼2014-12-23 15:25:32
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wanxiagao

金虫 (小有名气)
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16楼: Originally posted by archbishop at 2014-12-23 14:49:40
1. 如果你用C18的话就必须加离子对试剂。
2. 按照文献的方法。最好是用色谱纯的。

我查有个文献条件是这样的：
Stable-C18反相柱，流速1.2ml/min，260nm紫外检测，柱温：25，进样量100ul
流动相：80% 10mMKH2PO4(PH7.0)+20%甲醇
滤膜0.22um水相膜（四氟乙烯膜）


请问Stable-C18反相柱和普通的C18反相柱有啥区别哈
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19楼2014-12-23 20:11:05
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archbishop

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19楼: Originally posted by wanxiagao at 2014-12-23 20:11:05
我查有个文献条件是这样的：
Stable-C18反相柱，流速1.2ml/min，260nm紫外检测，柱温：25，进样量100ul
流动相：80% 10mMKH2PO4(PH7.0)+20%甲醇
滤膜0.22um水相膜（四氟乙烯膜）


请问Stable-C18反相柱和普 ...

没有这种柱子，我只知道安捷伦的StableBond，你把那文献发一下
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20楼2014-12-23 21:04:32
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wanxiagao

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20楼: Originally posted by archbishop at 2014-12-23 21:04:32
没有这种柱子，我只知道安捷伦的StableBond，你把那文献发一下...

是一篇硕士论文，下不下来，我在百度文库在线看的。
题目是：葡萄酒发酵过程中原花色素和酿酒酵母相互作用机制的研究
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21楼2014-12-23 21:10:04
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archbishop

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21楼: Originally posted by wanxiagao at 2014-12-23 21:10:04
是一篇硕士论文，下不下来，我在百度文库在线看的。
题目是：葡萄酒发酵过程中原花色素和酿酒酵母相互作用机制的研究...

没搜到啊，你发链接吧
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22楼2014-12-23 21:19:44
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archbishop

禁虫 (职业作家)
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21楼: Originally posted by wanxiagao at 2014-12-23 21:10:04
是一篇硕士论文，下不下来，我在百度文库在线看的。
题目是：葡萄酒发酵过程中原花色素和酿酒酵母相互作用机制的研究...

SB-C18的datasheet，你可以参考一下。
http://www.chem.agilent.com/Libr ... lic/820644-002f.pdf
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23楼2014-12-23 21:31:16
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wanxiagao

金虫 (小有名气)
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23楼: Originally posted by archbishop at 2014-12-23 21:31:16
SB-C18的datasheet，你可以参考一下。
http://www.chem.agilent.com/Library/datasheets/Public/820644-002f.pdf...

http://wenku.baidu.com/link?url= ... KdQl0tjZR1baaqnwz8W，这个文档的53-54页，论文本身的42-43页
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24楼2014-12-23 21:39:55
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wanxiagao

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25楼: Originally posted by archbishop at 2014-12-23 21:51:47
确实没查到这种柱子，或许不是很知名的牌子。我觉得应该是他写的不准确，就是安捷伦的StableBond...

写得不详细，安捷伦的StableBond不是常有的柱子吧
我完全的外行哈，感谢你这么热心解答我疑问
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26楼2014-12-23 21:58:11
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archbishop

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26楼: Originally posted by wanxiagao at 2014-12-23 21:58:11
写得不详细，安捷伦的StableBond不是常有的柱子吧
我完全的外行哈，感谢你这么热心解答我疑问...

不谢。是常用的柱子。
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27楼2014-12-23 23:30:38
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syhorchid2楼
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