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wanlh

铜虫 (初入文坛)

[求助] 药物对脂肪酶的抑制活性测定

初次做酶的抑制活性,想知道用荧光法4-muo 作为底物,测定某药物对脂肪酶的抑制IC50值,怎么设定对照组,怎么计算抑制率呢?
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野兰

新虫 (初入文坛)

请问楼主有继续测脂肪酶抑制的IC50值吗?我查了文献,用4-MUO做底物,多是加25uL 样品,25uL 1mg/ml酶溶液,50ul 0.1mM 4-MUO,孵育,再加pH=4.2的柠檬酸钠终止反应,我在做的时候,加入柠檬酸钠后,在360nm 激发波460nm发射波长下测吸光度,都几乎没有吸收了。不加终止反应液反而是正常的。请问楼主有遇到类似情况吗?为什么要加柠檬酸钠终止反应呢?
2楼2016-07-26 11:06:42
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野兰

新虫 (初入文坛)

楼主有继续用4-MUO做底物测定脂肪酶抑制的IC50值吗?有些问题很想请教一下,我现在加入0.1M pH=4.2的柠檬酸钠终止反应液,360nm激发、460nm发射波长下就几乎没有吸收?楼主测的时候加了这个终止反应液吗?加了以后吸光度有什么样的变化呢?求赐教
3楼2016-07-26 20:34:46
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落纷飞

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 野兰 at 2016-07-26 20:34:46
楼主有继续用4-MUO做底物测定脂肪酶抑制的IC50值吗?有些问题很想请教一下,我现在加入0.1M pH=4.2的柠檬酸钠终止反应液,360nm激发、460nm发射波长下就几乎没有吸收?楼主测的时候加了这个终止反应液吗?加了以后吸 ...

请问您最后问题解决了吗
4楼2019-11-14 16:49:09
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