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hechunxu

银虫 (初入文坛)

[求助] ACE抑制活性的测定

用紫外分光光度计测定ACE活性时,用什么溶液来调零?可不可以用公式中的任意一个呢?
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迷途的羔羊
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codyliu

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hechunxu: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-09 09:59:16
用灭活的ACE处理HHL抑制肽体系作为空白,不可以任意选用,好好看下cushman的文章
2楼2013-05-07 10:36:26
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雨梦无声

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
弄一个样:把你加抗ACE 的样和加终止反应的盐酸顺序调过来。也就是空白样。紫外好麻烦的,还是用HPLC吧
3楼2013-05-07 16:36:16
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hechunxu

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by codyliu at 2013-05-07 10:36:26
用灭活的ACE处理HHL抑制肽体系作为空白,不可以任意选用,好好看下cushman的文章

我测下的样品组几乎都是负值,这是为什么呢?
迷途的羔羊
4楼2013-05-09 10:37:57
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hechunxu

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2013-05-07 16:36:16
弄一个样:把你加抗ACE 的样和加终止反应的盐酸顺序调过来。也就是空白样。紫外好麻烦的,还是用HPLC吧

我测下的样品组几乎都是负值,偶尔有一两个正值这是为什么呢?
迷途的羔羊
5楼2013-05-09 10:39:23
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codyliu

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hechunxu at 2013-05-09 10:39:23
我测下的样品组几乎都是负值,偶尔有一两个正值这是为什么呢?...

这就是紫外的误差问题,这个问题实际上很难解决,所以,我不建议你用紫外,如果非得要用,建议你就用Hip+HHL走一次全过程,多做几个样品,直到你最后能保证你对Hip的萃取已经达到稳定后再做ACE抑制实验吧,
6楼2013-05-09 12:00:09
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hechunxu

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by codyliu at 2013-05-09 12:00:09
这就是紫外的误差问题,这个问题实际上很难解决,所以,我不建议你用紫外,如果非得要用,建议你就用Hip+HHL走一次全过程,多做几个样品,直到你最后能保证你对Hip的萃取已经达到稳定后再做ACE抑制实验吧,...

我也知道紫外误差太大,不过我们实验室条件有限,不能用HPLC,只能用紫外,而且在制备的时候用的试剂也不是特别严格。
迷途的羔羊
7楼2013-05-09 13:37:27
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codyliu

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by hechunxu at 2013-05-09 13:37:27
我也知道紫外误差太大,不过我们实验室条件有限,不能用HPLC,只能用紫外,而且在制备的时候用的试剂也不是特别严格。...

你是本科生还是硕士,要是本科生,我就不客气的说一句蒙蒙数据得了。要是硕士你就按照我说的做吧,就是先不要做反应这一步,用HHL和 Hip缓冲液萃取,知道你的结果稳定再做别的,要不就果断的换个题,这个题这么做下去没有什么意义了。 还有,制备抑制剂时候的试剂纯度要求也不算太高。祝你好运吧。
8楼2013-05-09 13:47:41
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hechunxu

银虫 (初入文坛)

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8楼: Originally posted by codyliu at 2013-05-09 13:47:41
你是本科生还是硕士,要是本科生,我就不客气的说一句蒙蒙数据得了。要是硕士你就按照我说的做吧,就是先不要做反应这一步,用HHL和 Hip缓冲液萃取,知道你的结果稳定再做别的,要不就果断的换个题,这个题这么做下 ...

好吧。我再试试吧。
迷途的羔羊
9楼2013-05-10 11:49:24
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