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病毒提取所用的磷酸缓冲液(PB)
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各位大侠，help~！ 1，我提病毒颗粒的PB，在4℃冰箱放了几天后，里面有一些像菌丝的东西，那这个PB还能用么？ 2，病毒颗粒大小是50nm，加入PEG，NaCl后，我用了6500g离心，有些沉淀贴在壁上了，那PB重溶的时候，能弹下来么？ 我现在把沉淀冻在-20℃了，可以么？ 3，以后再用多大的离心力离心呢，是不是可以如下： 5500g，20min，取上清。 6600g，20min，沉淀重溶，转管至超速离心管。（这里的差速离心的离心力应该怎么确定呢？） 4，往超离管里加的时候，是先把重溶的沉淀放进去么？那超离管配平的时候，病毒颗粒不就也出来了么？ 我上次用的200nm~300nm的紫外，跑出来的曲线很奇怪。这是参比与样品调换后的两张图。是因为有杂质么？ 5，怎样在拍电镜之前就确定有无病毒颗粒呢？ 6，我提的是双分体病毒，dsRNA，若要用RT-PCR检测“5”的话，那PB要用DEPC水配吗？ 谢谢各位大神，我问题有点杂，先谢谢大家的耐心~~~  我只有这么多金币，都用上吧。 IMG_20141202_110716.jpg  IMG_20141129_220954.jpg |
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