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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 病原/病毒 » 病毒提取所用的磷酸缓冲液(PB)
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山脚下的喵

新虫 (小有名气)

[求助] 病毒提取所用的磷酸缓冲液(PB)

各位大侠，help~！
1，我提病毒颗粒的PB，在4℃冰箱放了几天后，里面有一些像菌丝的东西，那这个PB还能用么？
2，病毒颗粒大小是50nm，加入PEG，NaCl后，我用了6500g离心，有些沉淀贴在壁上了，那PB重溶的时候，能弹下来么？
     我现在把沉淀冻在-20℃了，可以么？
3，以后再用多大的离心力离心呢，是不是可以如下：
     5500g，20min，取上清。
     6600g，20min，沉淀重溶，转管至超速离心管。（这里的差速离心的离心力应该怎么确定呢？）
4，往超离管里加的时候，是先把重溶的沉淀放进去么？那超离管配平的时候，病毒颗粒不就也出来了么？
     我上次用的200nm~300nm的紫外，跑出来的曲线很奇怪。这是参比与样品调换后的两张图。是因为有杂质么？
5，怎样在拍电镜之前就确定有无病毒颗粒呢？
6，我提的是双分体病毒，dsRNA，若要用RT-PCR检测“5”的话，那PB要用DEPC水配吗？
谢谢各位大神，我问题有点杂，先谢谢大家的耐心~~~我只有这么多金币，都用上吧。

病毒提取所用的磷酸缓冲液(PB)
IMG_20141202_110716.jpg


病毒提取所用的磷酸缓冲液(PB)-1
IMG_20141129_220954.jpg
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