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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶在磷酸盐缓冲液中催化反应，缓冲液浓度对反应的影响?
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五水合硫酸铜

金虫 (初入文坛)

[交流] 酶在磷酸盐缓冲液中催化反应，缓冲液浓度对反应的影响? 已有3人参与

酶固定化后想测一下最佳反应条件，现在在磷酸钠缓冲液中进行催化反应，缓冲液浓度从25mM-125mM进行实验，发现50mM时转化率最高，请问这里影响酶促反应的是离子强度还是磷酸根的浓度?
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1楼 2013-11-25 22:05:49
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-11-26 08:42:08
虽然有些酶是需要钠离子的，但通常需要的浓度比较低。很少听说有酶需要磷酸根的。你用的磷酸钠缓冲液只是起pH缓冲作用，一般不提供酶促反应的离子。缓冲液的浓度可能会有一些影响是因为低浓度缓冲液的缓冲效果稍差，高浓度的缓冲液离子强度过高。
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2楼2013-11-26 05:04:50
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五水合硫酸铜

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-26 05:04:50
虽然有些酶是需要钠离子的，但通常需要的浓度比较低。很少听说有酶需要磷酸根的。你用的磷酸钠缓冲液只是起pH缓冲作用，一般不提供酶促反应的离子。缓冲液的浓度可能会有一些影响是因为低浓度缓冲液的缓冲效果稍差， ...

就是说缓冲液浓度太低的话稳定性也就会相对较差，起不到缓冲作用，但是浓度太高了容易引起酶变性失活，是吗？
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3楼2013-11-27 19:59:55
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sky_鼬

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
silicare: 金币+3, 应助指数+1, 谢谢参与 2013-11-29 09:17:49
有几个建议：1. 你的酶不固定化在磷酸钠缓冲液中进行催化反应，也是50mM时转化率最高吗？
                  2. 有条件的话可以监测不同缓冲液浓度时反应过程中pH的变化
                  3. 离子强度对你底物或者产物有影响吗？是否底物碰到高离子强度的缓冲液会降解？
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4楼2013-11-28 21:59:22
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五水合硫酸铜

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sky_鼬 at 2013-11-28 21:59:22
有几个建议：1. 你的酶不固定化在磷酸钠缓冲液中进行催化反应，也是50mM时转化率最高吗？
                  2. 有条件的话可以监测不同缓冲液浓度时反应过程中pH的变化
                  3. 离子强度对你底物或 ...

我的底物是有机不溶物，产物也是，之所以在磷酸钠缓冲液反应是为了保护酶，底物是用吐温80 助溶的。
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5楼2013-12-03 15:29:03
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Mi月满西楼

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我最近也遇到了类似问题，我的酶用双蒸水、25mM磷酸缓冲液两个体系反应，PH都为6.2左右，用磷酸缓冲液酶的活性降低
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没有做不到，只有想不到
6楼2015-08-06 20:46:23
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Mi月满西楼

新虫 (小有名气)
是不是离子浓度影响
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没有做不到，只有想不到
7楼2015-08-06 20:47:40
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