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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 间接免疫荧光（IFA） 求助
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福建生猪

新虫 (初入文坛)

[求助] 间接免疫荧光（IFA） 求助 已有1人参与

做了一个间接免疫荧光，一抗浓度做了5个稀释度，二抗1:100稀释使用。
具体操作：1.病毒接种细胞，24h，pbs冲洗。
                  2.80%乙醇固定1h，pbs冲洗。
                  3.0.1%BSA封闭，30min。
                  4.5个稀释度一抗（单抗）加入相应的孔，并设置对照加入PBS。37℃，湿盒孵育1h，pbs冲洗。
                  5.FITC标记二抗（1:100），37℃，湿盒孵育1h，pbs冲洗。
           
实验的结果是：荧光信号不是很强，并且5个稀释度的结果，选不出最佳的一抗浓度。虫友分析下是什么原因。。
ps：荧光显微观察是在实验结束30min后才开始看的，显微镜故障。。。

间接免疫荧光（IFA） 求助
1-100.jpg


间接免疫荧光（IFA） 求助-1
1-300.jpg
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1楼 2014-12-12 09:10:55
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linsui1989

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们的固定液是丙酮:乙醇3:2，固定15分钟，只要抗原抗体反应，就有荧光

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-12-12 16:15:01
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当歌纵马

新虫 (初入文坛)
这个不能算荧光吧
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3楼2017-05-24 08:54:57
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