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刘沛文

金虫 (小有名气)

[求助] 体外细菌实验详细步骤 已有1人参与

本人非此专业,因论文需要,需做提取物的体外抑菌实验(常见细菌和真菌),求从培养基的配制到实验结束的详细步骤,感激不尽!越详细越好,,,

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波波斯猫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
刘沛文(dllchina代发): 金币+5, 谢谢应助,多多交流 2014-03-21 22:24:10
laozuzunzhe: 金币+5, good! 2014-03-21 22:32:57
1、购买想做的菌种,细菌我一般用营养琼脂和营养肉汤30度培养过夜,真菌我用PDA培养基
2、对于细菌配制营养琼脂平板
3、将培养过夜的菌液取200ul涂布到平板上
4、用纸片法或牛津杯法加入一定量你的提取物,纸片和牛津被需提前灭菌
5、30度培养过夜过,用尺子量抑菌圈的大小
6、真菌我配制PDA培养基,将真菌接种在培养基的中央以及周围辐射四个点,纸片法或牛津杯法加入一定量你的提取物,37度培养几天后,菌丝会蔓延生长,若提取物有抑菌作用,会出现抑菌圈,量大小即可
2楼2014-03-21 11:20:43
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刘沛文

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 波波斯猫 at 2014-03-21 11:20:43
1、购买想做的菌种,细菌我一般用营养琼脂和营养肉汤30度培养过夜,真菌我用PDA培养基
2、对于细菌配制营养琼脂平板
3、将培养过夜的菌液取200ul涂布到平板上
4、用纸片法或牛津杯法加入一定量你的提取物,纸片和 ...

细菌用沙氏琼脂培养基,真菌用LB琼脂培养基行么?还有怎样配制一定浓度的菌种?抑菌实验每毫升多少个细菌为宜?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-03-21 12:12:00
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波波斯猫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 刘沛文 at 2014-03-21 12:12:00
细菌用沙氏琼脂培养基,真菌用LB琼脂培养基行么?还有怎样配制一定浓度的菌种?抑菌实验每毫升多少个细菌为宜?
...

细菌用LB应该可以,真菌还是用真菌特有培养基吧,LB没听说过
抑菌实验200ul涂布就可以了,平板比较湿的话,100ul也可以
一定浓度的菌种需要菌落计数,过夜培养细菌后,用生理盐水梯度稀释,然后一般取10-6、10-7和10-8三个梯度取100ul涂布,做2-3个重复,以此推算出原菌落的个数
4楼2014-03-21 12:18:50
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