24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1472  |  回复: 5

sherry_cjy

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sherry_cjy

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

2楼2014-12-10 19:52:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sherry_cjy(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-11 21:09:39
pcr产物是不是可以切胶回收纯化一下?如果测序信号还不好的话,是否可以尝试连载体后测序?

BSA应该可以增加PCR特异性和扩增效率吧,纯化后的pcr产物中已经不含BSA了,对后续应该没影响。
做一个阳光、开朗的小和尚
3楼2014-12-11 08:34:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sherry_cjy

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

4楼2014-12-11 15:34:59
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

june0609

捐助贵宾 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sherry_cjy at 2014-12-11 15:34:59
谢谢~他们是过膜的方式纯化的,不过BSA应该也没有什么影响吧?之前用这个引物测序结果都是很好的,怎么这次就会这样呢?……连载体后测序又是好大的工作量,快毕不了业了……愁死我了...

BSA在经过纯化之后,应该会被去除,不影响测序。个人认为可能的问题有:
1.换测序公司再测一次,华大的一代测序不见得好,我们有在华大测过没信号的样品,送到其他公司去可以测出来的。你可以换几家都送送试试看。
2.确认一下测序引物是否合适。PCR的引物作为测序引物不一定合适。测序引物对匹配度的要求会更严格一些,不能有保护碱基等。另外,如果序列中存在引物结合的同源序列,或者高GC含量,也会影响测序。你可以把参考序列情况和测序公司说明一下,看他们是否能另外设计引物从片段中间开始测。
3.序列本身不纯。确认一下你的基因是否有多拷贝,是否有snp位点。之前我做过一个酵母的基因,因为是多倍体,序列中有一些位点存在多样性,最后测序结果在某个位点之后就很乱。最终还是通过TA克隆挑单克隆来解决的。做一次也挺快的,顺利的话3天左右就搞定了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2014-12-12 23:05:00
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sherry_cjy

禁虫 (初入文坛)

送红花一朵
本帖内容被屏蔽

6楼2014-12-17 13:41:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sherry_cjy 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +4 丢掉懒惰 2026-03-27 7/350 2026-03-28 08:07 by baoball
[考研] 311求调剂 +8 lin0039 2026-03-26 8/400 2026-03-28 08:00 by Iveryant
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +10 路痴小琪 2026-03-27 10/500 2026-03-28 03:36 by fmesaito
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考博] 26申博 +3 加油冲啊! 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 299求调剂 +6 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 6/300 2026-03-27 12:43 by 果果妈咪
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 材料学硕,求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
信息提示
请填处理意见