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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » cDNA模板的PCR，结束后管里有白色絮状沉淀
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mervyntin

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA模板的PCR，结束后管里有白色絮状沉淀 已有4人参与

我做的植物果实RNA反转录获得的cDNA，现在筛选引物，同样引物有时有带，有时没有，后续效果都不好。
现发现一个问题，在PCR之前确定体系里没有沉淀，P完之后每管里都有，白色的絮状物，请教这是什么东西？
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1楼 2014-12-03 10:51:37
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mervyntin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-12-03 10:54:06
我觉得是你提取RNA纯度不够，混入了蛋白质，受热之后变性沉淀。

反转录时未发现沉淀，是跑普通PCR是看见的，RNA的260/280是1.9左右，但是260/230的确低，在0.6左右
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4楼2014-12-03 16:22:44
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cckk_2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-03 21:10:26
我觉得是你提取RNA纯度不够，混入了蛋白质，受热之后变性沉淀。
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科研炮灰
2楼2014-12-03 10:54:06
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-03 21:10:35
无中生有？我猜是DNA。你试试能不能溶解它？
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3楼2014-12-03 10:55:49
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mervyntin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bbqlhb at 2014-12-03 10:55:49
无中生有？我猜是DNA。你试试能不能溶解它？

P之前没有，P完肉眼看着就有几块
可以试试看能不能溶，现在这有杂质的跑电泳没条带，只有二聚体
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5楼2014-12-03 16:24:28
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