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天然蛋白纯化出问题,无法挂柱!阳离子,阴离子,疏水,都没办法!求大神解救! 已有5人参与
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本人做水产的,从章鱼中纯化天然蛋白,现在已知目的蛋白是磷酸丙糖异构酶。 有研究显示是酸性蛋白,但是我采用ph 8.5 20mM tris-HCl 上Q-sepharose强阴,没有办法吸附。目的蛋白直接就下来了…… 然后将未吸附采用pH 6.5 20mM PBS 透析之后,上SP-Sepharose阳离子柱,也是没有办法吸附……目的蛋白又直接下来了…… 采用阴离子之后的上AKTA 5ml 的 phenly FF ,1M的硫酸铵,pH 8.0 也是没有办法吸附……………… 求助大神,这应该怎么解决啊?! 紧急求救!!!!!老板要把我逼死了…… |
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2楼2014-11-26 19:18:49
tautou2012
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7楼2015-10-13 11:32:31
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