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麻烦帮看看 P出来的目的条带很浅 已有4人参与
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F：5'-GAGGCGATCGC GTTGTGGAGAGAGGGAGGT -3' R1：5'-CTAGCGGCCGC AGGTTTCTGAAGCTCAACTATG -3' Tm值说是72℃ 因为加酶切位点和保护碱基 实际引物Tm值是53-54℃ 按95℃ 5min 95℃ 45s 61℃ 45s 72℃ 45s 95℃ 45s 68℃ 45s 72℃ 45s 5-7 30cycle 72℃ 20min 4℃ forever 体系里上下游引物和模板都是1ul 目的片段很暗 以PCR产物20ul为模板(40ul体系）P出来光有二聚体  mir-345 20141120.jpg |
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