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supergreen

木虫 (小有名气)

[求助] 有关LC-MS/MS血浆样品分析方法建立相关问题 求大神们指点! 已有2人参与

小弟现有一新化合物,需要做药动学和分布,没有查阅到有关分析方法的文献,以前也没做过液质,求各位大侠走过路过指导一下
摸条件的思路是怎样的呢?先确定离子源,再做质谱的全扫描,确定m/z,然后再摸色谱条件,这样对么?
还有一个纠结的问题,摸条件时直接用血浆样品么?这样岂不是要先确定前处理方法?
小弟现在毫无头绪,无比混乱,还请各位大神能够给出一个详细的步骤啊 感激不尽!!
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renzhichu525

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
supergreen: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢! 2014-11-18 20:17:21
1.先称量溶解样品,配置一定浓度的储备液;
2.稀释到合适浓度进行质谱扫描,确定Q1和Q3;
3.用溶液摸索液相方法;
4.摸索样品处理方法;
5.两者相结合优化液相方法;
6.配制标准曲线查看线性。
2楼2014-11-18 11:09:27
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po_jzhang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
supergreen: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢!! 2014-11-18 20:17:38
先用标准品摸质谱的检测条件:包括离子源、电离电压等参数。具体每个仪器上都有自动优化程序,可以得到优化的参数。定量方法通常用MRM
再将质谱条件与色谱条件结合,建立一个液质的分析方法
测试标准品的液质分离情况,如满意,可以准备血浆样品了
血浆样品处理好后,通常需要在上液质前去杂蛋白,常用3倍体积的乙腈沉淀 (注意此时你样品的溶解性,如果不溶于乙腈,则选其他方法去杂蛋白)。血浆直接上样分析时杂质干扰多,且分离效果差,对仪器污染严重,所以不建议直接上样
分析时,配制标准品溶液,做标准曲线,然后采用MRM定量。
3楼2014-11-18 14:34:47
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