应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » BIFC实验，会因为A、B和YNE、YCE的不同组合导致实验结果不同吗？
81/1返回列表
查看: 3331  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xy656691

金虫 (正式写手)

[求助] BIFC实验，会因为A、B和YNE、YCE的不同组合导致实验结果不同吗？ 已有3人参与

Ａ蛋白融合在YNE，B蛋白融合在YCE。观察到YFP荧光；B蛋白在融合YNE，A蛋白融合在YCE。观察不到YFP荧光。这样问题就来了！！！
1，这能说明AB蛋白能够相互作用吗？
2，出现这种情况是否因为不同组合形成的融合蛋白导致A、B蛋白暴露出的结合位点不同？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-11-01 17:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AQ-Bio-Z

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xy656691: 金币+2, ★★★很有帮助, 这样也是很有必要啊！ 2014-11-02 18:51:05
没考虑你这样的想法，需要检测YC与B_Yn和A_Yc与YN

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-01 17:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xy656691: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-03 20:25:22
这就是这个方法的缺陷之一了，不同的连接方法很可能造成了相互作用位点距离过远或者被遮盖。因此对于蛋白相互作用需要做多种方法。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2014-11-02 19:26:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by starseacow at 2014-11-02 19:26:35
这就是这个方法的缺陷之一了，不同的连接方法很可能造成了相互作用位点距离过远或者被遮盖。因此对于蛋白相互作用需要做多种方法。

谢谢，酵母双杂交实验是不是存在同样的缺陷？如果用其他方法证明，最好用什么呢？pull down 还是 western?
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-03 20:25:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xy656691 at 2014-11-03 20:25:12
谢谢，酵母双杂交实验是不是存在同样的缺陷？如果用其他方法证明，最好用什么呢？pull down 还是 western?...

酵母双杂问题不在这里。你可以用酵母双杂加BiFC说明问题，每个方法都做western验证蛋白表达。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
5楼2014-11-04 00:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by starseacow at 2014-11-04 00:34:40
酵母双杂问题不在这里。你可以用酵母双杂加BiFC说明问题，每个方法都做western验证蛋白表达。...

酵母双杂交实验要互换载体验证吗？（Ａ蛋白融合在AD，B蛋白融合在BD。检测β-半乳糖苷酶；B蛋白在融合AD，A蛋白融合在BD，再次检测β-半乳糖苷酶）
赞一下 回复此楼
6楼2014-11-05 20:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xy656691: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢，之前不知道fret这个实验。 2014-11-06 09:20:15
个人其实不推荐用Y2H,因为如果不是酵母蛋白，而是其他物种蛋白，那么蛋白在酵母中的表达形态，量度，位置等等有可能完全和原来物种中的不一样。所以现在一般Y2H只是用来做筛选互作蛋白，但是进一步鉴定一般用其他方法，像你用的BiFC，还有Fret，pull down等等。但是每种方法都各有利弊，所以一般会用多种方法相结合来验证蛋白互作。
赞一下 回复此楼
7楼2014-11-06 02:38:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgp157

禁虫
本帖内容被屏蔽
8楼2022-07-10 11:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xy656691 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生（3个名额）地质化工冶金领域 +23 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 24/1200 2026-08-13 19:45 by gmZWQHF3zgnx
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 9/450 2026-08-13 19:29 by 启萌科技
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +8 医学老男孩 2026-08-13 18/900 2026-08-13 19:28 by Tide man
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭