应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » BIFC实验，会因为A、B和YNE、YCE的不同组合导致实验结果不同吗？
81/1返回列表
查看: 3071  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xy656691

金虫 (正式写手)

[求助] BIFC实验，会因为A、B和YNE、YCE的不同组合导致实验结果不同吗？ 已有3人参与

Ａ蛋白融合在YNE，B蛋白融合在YCE。观察到YFP荧光；B蛋白在融合YNE，A蛋白融合在YCE。观察不到YFP荧光。这样问题就来了！！！
1，这能说明AB蛋白能够相互作用吗？
2，出现这种情况是否因为不同组合形成的融合蛋白导致A、B蛋白暴露出的结合位点不同？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-11-01 17:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AQ-Bio-Z

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xy656691: 金币+2, ★★★很有帮助, 这样也是很有必要啊！ 2014-11-02 18:51:05
没考虑你这样的想法，需要检测YC与B_Yn和A_Yc与YN

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-01 17:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xy656691: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-03 20:25:22
这就是这个方法的缺陷之一了，不同的连接方法很可能造成了相互作用位点距离过远或者被遮盖。因此对于蛋白相互作用需要做多种方法。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2014-11-02 19:26:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by starseacow at 2014-11-02 19:26:35
这就是这个方法的缺陷之一了，不同的连接方法很可能造成了相互作用位点距离过远或者被遮盖。因此对于蛋白相互作用需要做多种方法。

谢谢，酵母双杂交实验是不是存在同样的缺陷？如果用其他方法证明，最好用什么呢？pull down 还是 western?
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-03 20:25:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xy656691 at 2014-11-03 20:25:12
谢谢，酵母双杂交实验是不是存在同样的缺陷？如果用其他方法证明，最好用什么呢？pull down 还是 western?...

酵母双杂问题不在这里。你可以用酵母双杂加BiFC说明问题，每个方法都做western验证蛋白表达。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
5楼2014-11-04 00:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by starseacow at 2014-11-04 00:34:40
酵母双杂问题不在这里。你可以用酵母双杂加BiFC说明问题，每个方法都做western验证蛋白表达。...

酵母双杂交实验要互换载体验证吗？（Ａ蛋白融合在AD，B蛋白融合在BD。检测β-半乳糖苷酶；B蛋白在融合AD，A蛋白融合在BD，再次检测β-半乳糖苷酶）
赞一下 回复此楼
6楼2014-11-05 20:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xy656691: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢，之前不知道fret这个实验。 2014-11-06 09:20:15
个人其实不推荐用Y2H,因为如果不是酵母蛋白，而是其他物种蛋白，那么蛋白在酵母中的表达形态，量度，位置等等有可能完全和原来物种中的不一样。所以现在一般Y2H只是用来做筛选互作蛋白，但是进一步鉴定一般用其他方法，像你用的BiFC，还有Fret，pull down等等。但是每种方法都各有利弊，所以一般会用多种方法相结合来验证蛋白互作。
赞一下 回复此楼
7楼2014-11-06 02:38:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgp157

禁虫
本帖内容被屏蔽
8楼2022-07-10 11:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xy656691 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 期刊推荐 +3 材料研究生 2026-04-15 5/250 2026-04-20 16:02 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 通信工程求调剂！！！ +7 zlb770521 2026-04-14 7/350 2026-04-19 20:56 by Equinoxhua
[考研] 297，工科调剂? +11 河南农业大学-能 2026-04-14 11/550 2026-04-19 20:07 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂推荐 +9 小聂爱学习 2026-04-14 9/450 2026-04-19 17:03 by 中豫男
[考研] 291求调剂 +12 关忆北. 2026-04-14 13/650 2026-04-19 16:50 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 294求调剂 +15 淡然654321 2026-04-15 15/750 2026-04-19 08:20 by cuisz
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 297，工科调剂? +5 河南农业大学-能 2026-04-14 5/250 2026-04-18 15:17 by Equinoxhua
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[考研] 一志愿华中农业071010，320求调剂 +17 困困困困坤坤 2026-04-14 19/950 2026-04-17 20:08 by 关一盏灯cd
[考研] 一志愿A区211，22408 321求调剂 +6 随心所欲☆ 2026-04-15 7/350 2026-04-15 21:45 by lbsjt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭