24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2827  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xy656691

金虫 (正式写手)

[求助] BIFC实验,会因为A、B和YNE、YCE的不同组合导致实验结果不同吗?已有3人参与

A蛋白融合在YNE,B蛋白融合在YCE。观察到YFP荧光;B蛋白在融合YNE,A蛋白融合在YCE。观察不到YFP荧光。这样问题就来了!!!
1,这能说明AB蛋白能够相互作用吗?
2,出现这种情况是否因为不同组合形成的融合蛋白导致A、B蛋白暴露出的结合位点不同?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xy656691: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢,之前不知道fret这个实验。 2014-11-06 09:20:15
个人其实不推荐用Y2H,因为如果不是酵母蛋白,而是其他物种蛋白,那么蛋白在酵母中的表达形态,量度,位置等等有可能完全和原来物种中的不一样。所以现在一般Y2H只是用来做筛选互作蛋白,但是进一步鉴定一般用其他方法,像你用的BiFC,还有Fret,pull down等等。但是每种方法都各有利弊,所以一般会用多种方法相结合来验证蛋白互作。
7楼2014-11-06 02:38:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xy656691 的主题更新
信息提示
请填处理意见