应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » BIFC实验，会因为A、B和YNE、YCE的不同组合导致实验结果不同吗？
81/1返回列表
查看: 3039  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xy656691

金虫 (正式写手)

[求助] BIFC实验，会因为A、B和YNE、YCE的不同组合导致实验结果不同吗？ 已有3人参与

Ａ蛋白融合在YNE，B蛋白融合在YCE。观察到YFP荧光；B蛋白在融合YNE，A蛋白融合在YCE。观察不到YFP荧光。这样问题就来了！！！
1，这能说明AB蛋白能够相互作用吗？
2，出现这种情况是否因为不同组合形成的融合蛋白导致A、B蛋白暴露出的结合位点不同？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-11-01 17:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AQ-Bio-Z

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xy656691: 金币+2, ★★★很有帮助, 这样也是很有必要啊！ 2014-11-02 18:51:05
没考虑你这样的想法，需要检测YC与B_Yn和A_Yc与YN

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-01 17:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xy656691: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-03 20:25:22
这就是这个方法的缺陷之一了，不同的连接方法很可能造成了相互作用位点距离过远或者被遮盖。因此对于蛋白相互作用需要做多种方法。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2014-11-02 19:26:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by starseacow at 2014-11-02 19:26:35
这就是这个方法的缺陷之一了，不同的连接方法很可能造成了相互作用位点距离过远或者被遮盖。因此对于蛋白相互作用需要做多种方法。

谢谢，酵母双杂交实验是不是存在同样的缺陷？如果用其他方法证明，最好用什么呢？pull down 还是 western?
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-03 20:25:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xy656691 at 2014-11-03 20:25:12
谢谢，酵母双杂交实验是不是存在同样的缺陷？如果用其他方法证明，最好用什么呢？pull down 还是 western?...

酵母双杂问题不在这里。你可以用酵母双杂加BiFC说明问题，每个方法都做western验证蛋白表达。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
5楼2014-11-04 00:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by starseacow at 2014-11-04 00:34:40
酵母双杂问题不在这里。你可以用酵母双杂加BiFC说明问题，每个方法都做western验证蛋白表达。...

酵母双杂交实验要互换载体验证吗？（Ａ蛋白融合在AD，B蛋白融合在BD。检测β-半乳糖苷酶；B蛋白在融合AD，A蛋白融合在BD，再次检测β-半乳糖苷酶）
赞一下 回复此楼
6楼2014-11-05 20:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xy656691: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢，之前不知道fret这个实验。 2014-11-06 09:20:15
个人其实不推荐用Y2H,因为如果不是酵母蛋白，而是其他物种蛋白，那么蛋白在酵母中的表达形态，量度，位置等等有可能完全和原来物种中的不一样。所以现在一般Y2H只是用来做筛选互作蛋白，但是进一步鉴定一般用其他方法，像你用的BiFC，还有Fret，pull down等等。但是每种方法都各有利弊，所以一般会用多种方法相结合来验证蛋白互作。
赞一下 回复此楼
7楼2014-11-06 02:38:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgp157

禁虫
本帖内容被屏蔽
8楼2022-07-10 11:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xy656691 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 专硕310求调剂 +7 捞捞我…. 2026-04-04 8/400 2026-04-08 20:24 by yutian743
[考研] 一志愿生物与医药，296分，求调剂 +14 66鹿 2026-04-03 16/800 2026-04-08 10:38 by tjzhao
[考研] 0854求调剂 +9 亨氏番茄沙司 2026-04-06 10/500 2026-04-07 14:37 by shdgaomin
[考研] 295求调剂 +18 xndjjj 2026-04-04 19/950 2026-04-07 11:02 by wangjy2002
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
[考研] 求调剂 +4 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 15:22 by wos666
[考研] 一志愿河北工业大学材料工程，初试344求专硕调剂 +6 15933906766 2026-04-05 6/300 2026-04-06 13:21 by 无际的草原
[考研] 一志愿南航，数一英一学硕317求调剂！！ +6 Acaciad 2026-04-04 6/300 2026-04-06 12:13 by 考研学校招点人
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +11 梁富贵险中求 2026-04-04 13/650 2026-04-06 07:24 by houyaoxu
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 21:22 by 学员8dgXkO
[考研] 材料调剂 +13 一样YWY 2026-04-03 14/700 2026-04-05 18:20 by 蓝云思雨
[考研] 085600调剂 +9 东照照照 2026-04-04 9/450 2026-04-05 13:44 by ujn_zhuj
[考研] 358求调剂 +7 秋gk 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:29 by huangmoli
[考研] 294求调剂 +6 Grey_Ey 2026-04-02 9/450 2026-04-04 22:07 by hemengdong
[考研] 283分求调剂 +7 小聂爱学习 2026-04-03 7/350 2026-04-04 21:51 by hemengdong
[考研] 考研求调剂 +3 木心想继续深造 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:56 by 啵啵啵0119
[考研] 数二英二348求调剂 +4 hxdzj1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:25 by zhq0425
[考研] 286求调剂 +8 lim0922 2026-04-02 8/400 2026-04-03 20:19 by rzh123456
[考研] 302求调剂 +9 zyx上岸！ 2026-04-02 9/450 2026-04-02 23:07 by 马儿快快地跑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭