24小时热门版块排行榜    

查看: 1203  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zzhjiangnan

银虫 (小有名气)

[求助] 新手请教一下,换了个基因就不表达是什么原因 已有2人参与

我的质粒上卡纳霉素基因表达量很高,但是我保留其他组件(ATG之前的序列),在同一质粒上只把卡那霉素基因换成另一种蛋白基因,就不表达了,这个从理论上应该怎么讲?求各位大神帮忙指点分析一下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhjiangnan

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 灰血动物 at 2014-10-31 11:27:00
蛋白表达是个较为复杂的问题

同源 异源?

宿主选择?

稀有密码子?

诱导条件优化等等。。。。。。

在谷氨酸棒杆菌里用一种质粒,它的kan抗性蛋白表达量很高,我把质粒kan基因前的1000bp片段克隆出来,连到这个质粒的我的目的基因前面(1000bp和我的目的基因之间有6bp的酶切位点),但是目的基因就不表达。是密码子的问题吗?
5楼2014-10-31 13:26:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-10-31 13:35:38
信息好少。。。你怎么替换的kan基因?如果是酶切,确定酶切位点不会切断其他的质粒序列?如果你替换了kan,你怎么筛选的你的质粒,还有第二个抗性基因吗?

楼主最好把质粒的图放上来,这样才便于大家帮你分析
2楼2014-10-29 23:40:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

灰血动物

金虫 (小有名气)

蛋白表达是个较为复杂的问题

同源 异源?

宿主选择?

稀有密码子?

诱导条件优化等等。。。。。。
未完成
3楼2014-10-31 11:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhjiangnan

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sun_in_night at 2014-10-29 23:40:36
信息好少。。。你怎么替换的kan基因?如果是酶切,确定酶切位点不会切断其他的质粒序列?如果你替换了kan,你怎么筛选的你的质粒,还有第二个抗性基因吗?

楼主最好把质粒的图放上来,这样才便于大家帮你分析

不好意思我说的太理论了,我是把质粒kan基因前的1000bp片段克隆出来,连到这个质粒的我的目的基因前面(1000bp和我的目的基因之间有6bp的酶切位点),但是目的基因就不表达。
4楼2014-10-31 13:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +4 瞬息宇宙 2026-08-10 4/200 2026-08-11 02:02 by 旁观2020
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +3 Tide man 2026-08-10 3/150 2026-08-10 21:48 by GZUZM
[基金申请] filecode +8 documentary 2026-08-10 8/400 2026-08-10 19:20 by loufangrui
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +14 Lanmanbaby 2026-08-09 22/1100 2026-08-10 14:57 by wwncly
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +11 archvillain 2026-08-04 13/650 2026-08-10 14:41 by seekfind
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见