24小时热门版块排行榜    

查看: 1057  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zzhjiangnan

银虫 (小有名气)

[求助] 新手请教一下,换了个基因就不表达是什么原因 已有2人参与

我的质粒上卡纳霉素基因表达量很高,但是我保留其他组件(ATG之前的序列),在同一质粒上只把卡那霉素基因换成另一种蛋白基因,就不表达了,这个从理论上应该怎么讲?求各位大神帮忙指点分析一下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

灰血动物

金虫 (小有名气)

蛋白表达是个较为复杂的问题

同源 异源?

宿主选择?

稀有密码子?

诱导条件优化等等。。。。。。
未完成
3楼2014-10-31 11:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-10-31 13:35:38
信息好少。。。你怎么替换的kan基因?如果是酶切,确定酶切位点不会切断其他的质粒序列?如果你替换了kan,你怎么筛选的你的质粒,还有第二个抗性基因吗?

楼主最好把质粒的图放上来,这样才便于大家帮你分析
2楼2014-10-29 23:40:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhjiangnan

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sun_in_night at 2014-10-29 23:40:36
信息好少。。。你怎么替换的kan基因?如果是酶切,确定酶切位点不会切断其他的质粒序列?如果你替换了kan,你怎么筛选的你的质粒,还有第二个抗性基因吗?

楼主最好把质粒的图放上来,这样才便于大家帮你分析

不好意思我说的太理论了,我是把质粒kan基因前的1000bp片段克隆出来,连到这个质粒的我的目的基因前面(1000bp和我的目的基因之间有6bp的酶切位点),但是目的基因就不表达。
4楼2014-10-31 13:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhjiangnan

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 灰血动物 at 2014-10-31 11:27:00
蛋白表达是个较为复杂的问题

同源 异源?

宿主选择?

稀有密码子?

诱导条件优化等等。。。。。。

在谷氨酸棒杆菌里用一种质粒,它的kan抗性蛋白表达量很高,我把质粒kan基因前的1000bp片段克隆出来,连到这个质粒的我的目的基因前面(1000bp和我的目的基因之间有6bp的酶切位点),但是目的基因就不表达。是密码子的问题吗?
5楼2014-10-31 13:26:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265求调剂 +4 梁梁校校 2026-03-19 4/200 2026-03-20 00:03 by 23Postgrad
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +5 Doleres 2026-03-19 5/250 2026-03-19 20:14 by 制度的
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +8 zlingli 2026-03-13 8/400 2026-03-19 16:32 by 轻松不少随
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 10/500 2026-03-19 16:05 by 余麟余
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-19 14:07 by peike
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 332求调剂 +3 ydfyh 2026-03-17 3/150 2026-03-19 10:14 by 功夫疯狂
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见