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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR试验中，自设探针和引物使得阴性对照跑出曲线，求分析原因？
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nickjackson

铁虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR试验中，自设探针和引物使得阴性对照跑出曲线，求分析原因？

自己设计了一对引物，跑普通PCR鉴别抗原没有问题，后来根据引物设计了探针，现在上荧光定量探针和引物同时加入做阴性对照都会跑出曲线，常理应该是靠近0基线的直线，调整了引物和探针的自身浓度，配比，均还是有曲线产生，通过软件分析引物和探针也不发生聚合反应，求助有没有其他原因导致此结果，现阶段还在摸索引物和探针配比浓度。探针和引物配比做过1:1，1:2，1:4（20uL体系中），浓度也还在摸索。
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1楼 2014-10-27 12:40:14
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