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求大神相助~~~琼脂糖电泳~~~ 已有2人参与
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现在我做的实验的是DNA的损伤实验，对生物学简直是一丁点都不了解，就跟着前辈们的方法步骤做~~但是，问题巨多~~~实验做了大半年都没有进展。 缓冲液用的是TBE 琼脂糖和TBE混合后制胶在微波炉里面加热，直到混合液变澄清。等到混合液温度降到78°的时候加10μL的EB。然后让胶冷却两个小时以上。最后加样，通电跑胶，100V,30mA，跑胶16个小时，跑胶的时候还要再电泳槽两端各加20μL的EB。 问题是我同样的只是灭菌过得超纯水，在胶的两个地方跑出来的结果相差巨大（同一块胶），不知道这是什么问题？ 并且应该根据浓度梯度得出来的数据也是乱七八糟一点规律性都没有。有时候甚至样品对DNA的损伤还会小于灭菌后的水对DNA的损伤。 电泳槽之前坏过，用有机溶液粘好了。 各位大神能不能看出是哪个方面出了问题啊？？？？？ 按我上面说的方法师兄师姐都做出来结果的。。。。 |
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