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王艳霞

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求解:荧光定量PCR熔解曲线标准质粒和样品的峰值不一致 已有1人参与

染料法做绝对定量PCR,同一对引物扩增标准质粒和样品,发现部分样品熔解曲线的峰值与标准质粒不在同一位置,差别大于1,样品与样品之间有的也大于1。求大神指点!

求解:荧光定量PCR熔解曲线标准质粒和样品的峰值不一致
标准质粒与样品的熔解曲线
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笑到最后才是最美的!
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苯苯兔

银虫 (初入文坛)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-10-14 19:18:47
跟你的样品有关 样品DNA 含有杂质

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-10-14 10:56:10
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王艳霞

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 苯苯兔 at 2014-10-14 10:56:10
跟你的样品有关 样品DNA 含有杂质

谢谢指点。不过这些杂质可能是什么?接下来我应该怎么纯化呢?我的样品是提取的土壤微生物总DNA。
笑到最后才是最美的!
3楼2014-10-14 11:32:59
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不负青春7

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你的问题解决了没?我的样品是这样,标准质粒Tm和样品Tm不一样,但样品的Tm都一样的,不知道是什么问题。
4楼2016-01-31 02:12:19
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tangyafang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 不负青春7 at 2016-01-31 02:12:19
请问你的问题解决了没?我的样品是这样,标准质粒Tm和样品Tm不一样,但样品的Tm都一样的,不知道是什么问题。

你的质粒和样品出峰温度相差几度?后来怎么解决的?
5楼2016-05-29 23:50:31
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