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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求解：荧光定量PCR熔解曲线标准质粒和样品的峰值不一致
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王艳霞

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求解：荧光定量PCR熔解曲线标准质粒和样品的峰值不一致 已有1人参与

染料法做绝对定量PCR，同一对引物扩增标准质粒和样品，发现部分样品熔解曲线的峰值与标准质粒不在同一位置，差别大于1，样品与样品之间有的也大于1。求大神指点！

求解：荧光定量PCR熔解曲线标准质粒和样品的峰值不一致
标准质粒与样品的熔解曲线
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笑到最后才是最美的！
1楼 2014-10-14 10:13:13
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苯苯兔

银虫 (初入文坛)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-14 19:18:47
跟你的样品有关 样品DNA 含有杂质

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2014-10-14 10:56:10
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王艳霞

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 苯苯兔 at 2014-10-14 10:56:10
跟你的样品有关 样品DNA 含有杂质

谢谢指点。不过这些杂质可能是什么？接下来我应该怎么纯化呢？我的样品是提取的土壤微生物总DNA。
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笑到最后才是最美的！
3楼2014-10-14 11:32:59
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不负青春7

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你的问题解决了没？我的样品是这样，标准质粒Tm和样品Tm不一样，但样品的Tm都一样的，不知道是什么问题。
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4楼2016-01-31 02:12:19
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tangyafang

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 不负青春7 at 2016-01-31 02:12:19
请问你的问题解决了没？我的样品是这样，标准质粒Tm和样品Tm不一样，但样品的Tm都一样的，不知道是什么问题。

你的质粒和样品出峰温度相差几度？后来怎么解决的？
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5楼2016-05-29 23:50:31
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