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861565768铁虫 (小有名气)
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[求助]
关于血样处理的一些问题
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综合文献，血样预处理如下： 250μL冻融血浆 使用前加入25μL 6M高氯酸和125μL乙腈。混合物在聚丙烯管中使用旋涡混合器充分混合2min，然后5℃下静置30min，然后5℃条件下20000×g离心5min。将上清液和100μL 0.75M的碳酸钾适当混合30S.5℃ 下20000×g离心5min除去离心管中不溶的高氯酸钾。 问题：1、血样在处理液中所占比例比较高，怕提取的不完全，该怎么改进 2、样品最后需要再过滤之后上HPLC么，生物样品毕竟不干净，分析柱也不便宜 3、内标物在什么时候加，加多少合适呢（应该是直接先加在血浆里吧） 4、这里面所有物质的体积加入量有没有什么遵循的原则 开始实验前想先纸上谈兵，希望各位大神不要见笑，帮帮小弟！ 不甚感谢 |
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