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liyoulian12

金虫 (小有名气)

[求助] 色谱图走的很乱 已有2人参与

最近做肠外翻实验,得到的肠吸收液氮气吹干,用60%甲醇水溶解,再离心,取上清液过膜,滤液用waters2695进行分析,得到的谱图基线不平,但是之前做预实验的时候谱图还挺好,样品预处理都一样,分析条件也一样,不知道什么原因呢,希望大家给点建议,感谢!!!
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。。。。
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chenzhengyi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by liyoulian12 at 2014-10-10 10:30:57
乙腈加0.1%的甲酸,我试试看先,谢谢啦...

你们的色谱柱有恒温系统吧(根据9楼的帖子有感而发)

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有阳光的地方就会有阴影
10楼2014-10-10 15:05:18
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普通回帖

chenzhengyi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liyoulian12: 金币+2, 虽然。。。但还是谢谢 2014-10-09 14:01:02
是不是色谱流路有气泡?

[ 发自小木虫客户端 ]
有阳光的地方就会有阴影
2楼2014-10-08 13:33:32
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chenzhengyi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
liyoulian12: 金币+2, 谢谢 2014-10-09 14:01:37
楼主你上传的文件缺少很多重要信息……比如流动相组成,流速,检测波长等

[ 发自小木虫客户端 ]
有阳光的地方就会有阴影
3楼2014-10-08 13:36:35
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liyoulian12

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenzhengyi at 2014-10-08 13:36:35
楼主你上传的文件缺少很多重要信息……比如流动相组成,流速,检测波长等

流动相是0.1%的甲酸水-乙腈 梯度洗脱,流速是1ml/min,检测波长350nm,谢谢
。。。。
4楼2014-10-08 15:02:56
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liyoulian12

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chenzhengyi at 2014-10-08 13:33:32
是不是色谱流路有气泡?

压力差很稳定的
。。。。
5楼2014-10-08 15:03:36
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chenzhengyi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
liyoulian12: 金币+2, 谢谢 2014-10-11 11:38:53
引用回帖:
4楼: Originally posted by liyoulian12 at 2014-10-08 15:02:56
流动相是0.1%的甲酸水-乙腈 梯度洗脱,流速是1ml/min,检测波长350nm,谢谢...

乙腈为什么不加0.1%甲酸……走梯度的时候会更稳定。还有不知道你注意流动相要超声,色谱柱要平衡这些细节没。如果这些细节都没问题那就考虑一下样品的前处理(感觉你处理得太简单),你样品放久了可能会长菌或者有其他杂质产生……我想到的就那么多了

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有阳光的地方就会有阴影
6楼2014-10-09 20:06:23
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liyoulian12

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by chenzhengyi at 2014-10-09 20:06:23
乙腈为什么不加0.1%甲酸……走梯度的时候会更稳定。还有不知道你注意流动相要超声,色谱柱要平衡这些细节没。如果这些细节都没问题那就考虑一下样品的前处理(感觉你处理得太简单),你样品放久了可能会长菌或者有 ...

流动相超声了,色谱柱也平衡了,您做过肠外翻吗,样品有什么更好的处理方法呢,谢谢
。。。。
7楼2014-10-10 10:29:11
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liyoulian12

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by chenzhengyi at 2014-10-09 20:06:23
乙腈为什么不加0.1%甲酸……走梯度的时候会更稳定。还有不知道你注意流动相要超声,色谱柱要平衡这些细节没。如果这些细节都没问题那就考虑一下样品的前处理(感觉你处理得太简单),你样品放久了可能会长菌或者有 ...

乙腈加0.1%的甲酸,我试试看先,谢谢啦
。。。。
8楼2014-10-10 10:30:57
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
了解一下,我之前waters出现类似情况是因为开了空调导致的,同时根据你色谱图的不规律性,想知道你的色谱条件后有没有用高比例有机相冲洗色谱柱的过程?
归零
9楼2014-10-10 11:21:09
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