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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相图出了平峰，是什么原因
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自信丫头

新虫 (小有名气)

[求助] 液相图出了平峰，是什么原因

大家好，走液相HPLC的时候出了平峰，同样的条件，之前的峰是正常的，这个峰突然很乱，接下来走的4个样都出现平峰，第5个样开始再次恢复正常。ps：洗脱条件为，梯度洗脱，有机相的浓度先增加后减小。

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1楼 2012-12-23 21:11:40
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云轻0118

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看你的这个图,感觉是样品的问题,你下样品浓度,还有过滤下,样品不干净的话也会不出峰的,还有可能是流动相中进去空气了,多走一会就没事了.

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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拼搏，一切皆有可能
2楼2012-12-24 08:10:54
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sekiwang

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以紫外检测器为检测手段的液相检测原理是在流动相本底为基线的基础上观察是否有吸光度的变化，如有有改变则产生吸收峰，或为正向色谱峰，或为负的色谱峰，楼主这种情况是出现了比流动相本底吸收更弱的情况，因此出现了负的色谱峰，原因有很多，先从流动相和色谱系统找一下吧。
ps：详细的提供你的实验条件是讨论解决问题的前提，楼主说的太模糊了，希望能帮到你
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3楼2012-12-24 08:49:27
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自信丫头

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sekiwang at 2012-12-24 08:49:27
以紫外检测器为检测手段的液相检测原理是在流动相本底为基线的基础上观察是否有吸光度的变化，如有有改变则产生吸收峰，或为正向色谱峰，或为负的色谱峰，楼主这种情况是出现了比流动相本底吸收更弱的情况，因此出现 ...

流动相为A：5%乙酸  B：乙腈   梯度洗脱
0min20%--20min60%--24min80%--26min80%--30min20%--36min stop
一共走了9个样，都是未知样品，检测波长440nm，在第2-5个样的时候出现了如上图的平峰，第1,6-9个样正常。我想测定未知样品中440波长下目标化合物的浓度，谢谢
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4楼2012-12-24 10:02:51
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ccbright1016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你应该把参比波长打开了吧，还有就是你用的是什么仪器？
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5楼2012-12-24 12:44:38
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sekiwang

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 自信丫头 at 2012-12-24 10:02:51
流动相为A：5%乙酸  B：乙腈   梯度洗脱
0min20%--20min60%--24min80%--26min80%--30min20%--36min stop
一共走了9个样，都是未知样品，检测波长440nm，在第2-5个样的时候出现了如上图的平峰，第1,6-9个样正常。 ...

楼主的样品理化性质是怎样的？
我提几个问题你想想，看看有没有帮助：
1、你的目标成分理化性质是pH值敏感的么？需要在流动相中加入5%的乙酸来调节酸碱度？一般的情况下，如果不是化合物中含有特殊官能团，需要用大量的酸或碱来调节pH值的情况，我们采用的流动相中一般用0.1-1%的乙酸即可。
2、你需要分析的目标成分是几个？如果是单一成分的，从你的色谱图中来看完全可以用等度来洗脱，这就能保证基线的持平和稳定。
3、你可以不进样或者进一针甲醇，观察这时的色谱图情况就能判断是样品的问题还是非样品问题，如果是样品问题，那就改善样品处理方案，反之，改善色谱条件。
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6楼2012-12-25 08:49:27
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