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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)

[交流] 求高手帮帮忙~帮我看下我做的液相问题在哪里

今天做了液相,用的柱子是  C18的,流动相是乙腈和水混合物,ph为2.5左右,检测波长200nm,保过柱子之后跑基线一直跑不平,勉强进了一个样看看,我的是梯度洗脱,测量周期为30min,到了后15min,基线呈现约40度角开始往上跑,但是还是有峰值,我问了同学,同学给我说是只要是梯度洗脱都会有这种情况,跑个空白然后背景消除都行,我用的是D2000软件,不知道从哪设置啊~还是根本问题就不出在这里~哎,发愁啊,我这是头一次用液相,实验室也没有人特别懂,只好请大家帮帮忙,告诉我怎么办,怎么解决问题
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随风飘落1705

新虫 (小有名气)


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一般跑剃度基线是不平的,楼主不用担心,只要样品跑出来和基线吻合就没事了。空白要保证没有干扰峰就可以。

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2楼2014-10-07 17:18:19
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longyi706565

金虫 (正式写手)


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200nm的波长基线较难平,波长太低了,且梯度洗脱中坡度也较大,这很正常。
4楼2014-10-08 09:19:46
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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 随风飘落1705 at 2014-10-07 17:18:19
一般跑剃度基线是不平的,楼主不用担心,只要样品跑出来和基线吻合就没事了。空白要保证没有干扰峰就可以。

跑基线的时候就用梯度跑?还是用初始溶度跑?
3楼2014-10-07 22:52:02
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馒头爱生物

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你检测的什么物质,检测波长200nm比较低,能不能升高一点呢?
此外,你不加梯度的时候基线怎么样?梯度洗脱中的基线是不容易平稳的,你先用单一浓度试试看
5楼2014-10-08 11:16:17
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……


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检测波长太低了,你换一个质量好一点的乙腈可能有改善
人生若只如初见...
6楼2014-10-08 11:42:22
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
另外,水是用什么酸调的pH值,如果是醋酸或甲酸的话,基线肯定不会太好,这两个的紫外吸收截止波长在210左右,可以换成磷酸试试
人生若只如初见...
7楼2014-10-08 11:46:54
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chenzhengyi

木虫 (小有名气)


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波长200nm你定量都不稳定……

[ 发自小木虫客户端 ]
有阳光的地方就会有阴影
8楼2014-10-08 14:18:01
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aror

金虫 (正式写手)


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建议换个波长试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2014-10-09 08:57:33
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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by aror at 2014-10-09 08:57:33
建议换个波长试试

那我的物质吸收峰就在200~210,怎么换啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2014-10-11 19:32:06
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