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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求高手帮帮忙~帮我看下我做的液相问题在哪里
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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)

[交流] 求高手帮帮忙~帮我看下我做的液相问题在哪里

今天做了液相，用的柱子是  C18的，流动相是乙腈和水混合物，ph为2.5左右，检测波长200nm，保过柱子之后跑基线一直跑不平，勉强进了一个样看看，我的是梯度洗脱，测量周期为30min，到了后15min，基线呈现约40度角开始往上跑，但是还是有峰值，我问了同学，同学给我说是只要是梯度洗脱都会有这种情况，跑个空白然后背景消除都行，我用的是D2000软件，不知道从哪设置啊~还是根本问题就不出在这里~哎，发愁啊，我这是头一次用液相，实验室也没有人特别懂，只好请大家帮帮忙，告诉我怎么办，怎么解决问题
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1楼 2014-10-06 20:08:04
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

随风飘落1705

新虫 (小有名气)
★
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一般跑剃度基线是不平的，楼主不用担心，只要样品跑出来和基线吻合就没事了。空白要保证没有干扰峰就可以。

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2楼2014-10-07 17:18:19
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longyi706565

金虫 (正式写手)
★
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200nm的波长基线较难平，波长太低了，且梯度洗脱中坡度也较大，这很正常。
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4楼2014-10-08 09:19:46
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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 随风飘落1705 at 2014-10-07 17:18:19
一般跑剃度基线是不平的，楼主不用担心，只要样品跑出来和基线吻合就没事了。空白要保证没有干扰峰就可以。

跑基线的时候就用梯度跑？还是用初始溶度跑？
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3楼2014-10-07 22:52:02
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馒头爱生物

银虫 (小有名气)
★
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你检测的什么物质，检测波长200nm比较低，能不能升高一点呢？
此外，你不加梯度的时候基线怎么样？梯度洗脱中的基线是不容易平稳的，你先用单一浓度试试看
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5楼2014-10-08 11:16:17
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……
★
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检测波长太低了，你换一个质量好一点的乙腈可能有改善
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人生若只如初见...
6楼2014-10-08 11:42:22
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……
★
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另外，水是用什么酸调的pH值，如果是醋酸或甲酸的话，基线肯定不会太好，这两个的紫外吸收截止波长在210左右，可以换成磷酸试试
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人生若只如初见...
7楼2014-10-08 11:46:54
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chenzhengyi

木虫 (小有名气)
★
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波长200nm你定量都不稳定……

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有阳光的地方就会有阴影
8楼2014-10-08 14:18:01
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aror

金虫 (正式写手)
★
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建议换个波长试试

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9楼2014-10-09 08:57:33
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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by aror at 2014-10-09 08:57:33
建议换个波长试试

那我的物质吸收峰就在200～210，怎么换啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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10楼2014-10-11 19:32:06
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