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wo的海宝圆圆

新虫 (小有名气)

[交流] 求高手帮帮忙~帮我看下我做的液相问题在哪里

今天做了液相,用的柱子是  C18的,流动相是乙腈和水混合物,ph为2.5左右,检测波长200nm,保过柱子之后跑基线一直跑不平,勉强进了一个样看看,我的是梯度洗脱,测量周期为30min,到了后15min,基线呈现约40度角开始往上跑,但是还是有峰值,我问了同学,同学给我说是只要是梯度洗脱都会有这种情况,跑个空白然后背景消除都行,我用的是D2000软件,不知道从哪设置啊~还是根本问题就不出在这里~哎,发愁啊,我这是头一次用液相,实验室也没有人特别懂,只好请大家帮帮忙,告诉我怎么办,怎么解决问题
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……


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检测波长太低了,你换一个质量好一点的乙腈可能有改善
人生若只如初见...
6楼2014-10-08 11:42:22
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
另外,水是用什么酸调的pH值,如果是醋酸或甲酸的话,基线肯定不会太好,这两个的紫外吸收截止波长在210左右,可以换成磷酸试试
人生若只如初见...
7楼2014-10-08 11:46:54
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……


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18楼: Originally posted by wo的海宝圆圆 at 2014-10-15 16:32:23
我没调ph,我的配出来正好就是所需要的ph值...

不可能吧,那你的缓冲盐是什么,pH值怎么配到2.5的
人生若只如初见...
19楼2014-10-16 09:01:22
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……


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20楼: Originally posted by wo的海宝圆圆 at 2014-10-16 11:39:09
乙腈和水,加了四丁基硫酸氢铵,出来正好就2.5左右...

难怪,就是试剂的问题了,你试试就乙腈水,不加离子对试剂是什么情况
人生若只如初见...
21楼2014-10-16 13:45:07
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daisyzhangwei

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23楼: Originally posted by wo的海宝圆圆 at 2014-10-16 15:48:25
我今天测了一下物质的最大吸收峰~一共六种物质,最低的是205,最高的是300,我可以选择250nm不?影响大不大...

那你试试另外两个波长,波长高一点应该会好一些
人生若只如初见...
27楼2014-10-16 16:15:13
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