| 查看: 3410 | 回复: 9 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
xulinan木虫 (小有名气)
|
[求助]
质粒图谱与阅读框问题已有1人参与
|
||
|
有两个问题请教下。 1. 我们克隆基因到一个质粒上的时候，通常引物设计是酶切位点+His tag（如果纯化）+目的基因， 但是现在的问题是老师给了一个很奇怪的序列，His tag和目的基因都有，但是Histag前还多出来一些序列，并且这些碱基不是3的整数倍，他让我用不同的酶切位点克隆到另一个质粒上，我就想如果直接按他的要求直接克隆这个序列是不是翻译的时候就框移了，因为明显的His tag前面多的几个碱基不是3的倍数啊，困惑中，又不好意思直接去找老师说他给的序列不对。请问这种情况是否会发生翻译时候框移？谢谢 2. 据说如果用p413这种质粒是不存在翻译时框移现象的，请问这是为什么？p413图谱见下，而且看起来这个图谱中promoter是在XbaI一侧啊，但是如果用XbaI/EcoRI这对酶切的话，会把EcoRI设计到Forword primer中，这个我又迷惑了，方向虽然看着两头都行，但是terminator明显在EcoRI这侧啊？EcoRI设计到Forword primer中克隆进去的基因不就放了吗？一直对基因复制的各种方向搞不清楚，请大家点播一二，谢谢。  413.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有74人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
pet28a 空质粒双酶切图像问题
已经有15人回复- 启动子方向与目的基因方向
已经有4人回复
- 求助！基因ORF与终止子的连接问题
已经有6人回复
- 自己画质粒图，启动子的方向弄不明白
已经有7人回复
- 质粒大提的疑问！！高手进来解答一下~
已经有5人回复
- 什么方法确定插入目的片段后表达载体的阅读框有无发生变化？
已经有9人回复
- 求高手帮忙看看这个质粒图谱！我目的基因的启动子和终止子各是什么喃？
已经有12人回复
- 如何画好质粒图？
已经有11人回复
- 求质粒pCAMBIA1301 s（有两个35s的）的图谱
已经有8人回复
- 核糖体结合位点与ATG起始密码子的距离问题
已经有10人回复
- 奇怪的质粒电泳图，求解。。
已经有3人回复
- 质粒图谱上哪找？
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于质粒上终止子的疑问
已经有3人回复
- 【分享】pET_vector_map_质粒载体图谱
已经有5人回复
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24326.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
9楼2014-09-30 18:39:42
langzian
木虫 (正式写手)
- 应助: 31 (小学生)
- 金币: 2791.4
- 帖子: 341
- 在线: 132.4小时
- 虫号: 3151683
- 注册: 2014-04-18
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2014-09-30 03:44:35
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 905 (博后)
- 金币: 16463.5
- 散金: 1654
- 红花: 120
- 沙发: 39
- 帖子: 14449
- 在线: 2169.9小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2014-09-30 11:05:24
4楼2014-09-30 11:17:47