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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE的分离胶不凝，急求！！！谢谢朋友们！！！
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贾宇婷婷

铜虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE的分离胶不凝，急求！！！谢谢朋友们！！！ 已有8人参与

SDS-PAGE112%的分离胶不凝固怎么回事，求解~~~求教~~~
配方如下：30%的丙烯酰胺溶液：8ml
                 水：6.6ml
                 1.5M Tris (PH8.8) :5.0ml
                 10%AP：     0.2ml
                 10%SDS:     0.2ml
                 TEMED :        8  微升
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1楼 2014-09-26 15:54:24
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

陈赓大将

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
催化剂硫酸铵没加

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-09-26 16:06:12
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
丙烯酰胺中有没有甲叉双丙烯酰胺？
AP避光低温保存，失效后就没用了。
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4楼2014-09-27 09:36:52
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hwd6218554

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
查看AP和TEMED是不是放置时间很长了或者保存不当，有可能失效。可从其他实验室借点做个对照看看。凝胶过程中室温温度不能太低。
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5楼2014-09-27 09:53:30
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langzian

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议楼主全部换新的，然后确保都加了，自然会凝固

[ 发自小木虫客户端 ]
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江山
7楼2014-09-27 10:04:14
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小情绪你不懂

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

丙烯酰胺中必须加甲叉双丙烯酰胺、还有所有试剂建议换新的、TEMED可以尝试多加点、我之前多的量比你的大很多、、每次加的TEMED比你的多很多、每次都凝固很好啊
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8楼2014-09-29 19:11:34
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tjhyf2012

木虫 (小有名气)
过硫酸铵一般4度保存一周，最好现用现配。tris的pH也很关键，一定要精确一些。
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9楼2014-09-29 21:02:01
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冲姐

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

TEMED加的少吧，我是加10微升的，也不能太多，容易烧胶。
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10楼2014-09-30 08:44:12
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普通回帖

贾宇婷婷

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 陈赓大将 at 2014-09-26 16:06:12
催化剂硫酸铵没加

AP不就是催化剂吗？
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3楼2014-09-26 16:41:22
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贾宇婷婷

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hwd6218554 at 2014-09-27 09:53:30
查看AP和TEMED是不是放置时间很长了或者保存不当，有可能失效。可从其他实验室借点做个对照看看。凝胶过程中室温温度不能太低。

谢谢
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6楼2014-09-27 10:01:12
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