| 查看: 1565 | 回复: 3 | |||
shan_gao木虫 (小有名气)
|
[求助]
高效液相色谱求助 已有1人参与
|
|
哪位行家虫友帮忙解惑下： 我用的是安捷伦1200的液相色谱仪，色谱柱是10cm的短柱子，流动相用的是乙腈-磷酸盐混合溶液（另有离子对试剂）。图中A是标准品的色谱图（两种标准品混合溶液，是无机盐），柱温30度。B是我的样品在与A相同条件下测定的色谱图，柱温也是30度。C是在与A相同条件下测定的色谱图，柱温是45度。简而言之，就是A是混合标准品的图，B和C是同一份样品在不同温度下测的色谱图。峰1是我要测定的峰。 我的疑惑问题： 1、现在图中是均有倒峰出现，样品比标准品明显的多，是什么原因导致的倒峰出现并且这么严重呢？ 2、标准品中能看到峰2的存在，样品中也有。这个峰2我搞不清楚是什么原因，是我的标准品不纯吗？还是仪器检测器的原因（因为这个峰2随着温度的升高感觉跟峰1 分开了，但是总觉得不是一个正常出峰的峰形）？或者其他我不知道的原因呢？ 3、是这个图之外的问题，我在升温柱子后，测定样品什么的都很正常，当天做完后系统柱子均有冲洗平衡，然后走的时候将仪器关掉了，第二天来了之后却发现柱压变高了，考虑可能是柱子里残留了流动相的盐没有冲干净，于是就用95的水一直在冲洗柱子，后来问了柱子那边的工程师给与的建议也是95水低流速冲，冲了一天一夜了，柱压降了20多bar，后来由于仪器使用问题就没在继续冲柱子了，现在用95的乙腈和5的水保存着柱子。工程师说柱子最高承受温度是45度。我用的45度应该不会把柱子坏了吧？后来上网查到说离子对试剂对柱子有不可逆的伤害，难道是我加了离子对试剂的原因吗？现在好担心这个柱子，老板新买的刚出来的柱子给我用，别毁在了我的手里……我接下下来还是要继续冲我的柱子吗？该怎么办呢？  我是新手，第一次做的液相，很多问题不懂  ，也可能存在一些不恰当的表述，望虫友谅解并给与指导。 非常感谢！  图片.png |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么网上很多人说本周 12号出结果
已经有4人回复
-
基金中了
已经有15人回复
-
帮忙看看fileCode
已经有8人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有3人回复
-
FileCode能看出啥？
已经有15人回复
-
filecode
已经有8人回复
-
确定了，国自然21号放榜
已经有7人回复
-
综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？
已经有11人回复
-
关于代码变化问题，想知道的进来
已经有24人回复
-
静等基金结果
已经有16人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做高效液相色谱要注意哪些
已经有6人回复
- 安捷伦高效液相色谱求救
已经有19人回复
- 高效液相色谱求助
已经有24人回复
- 高效液相色谱分析
已经有4人回复
- 高效液相色谱HPLC培训教程(经典)
已经有14人回复
- 高效液相色谱图分析
已经有10人回复
- 高效液相色谱图数据处理
已经有13人回复
- 【求助】超高效液相容易堵柱子的问题
已经有20人回复
- 求助高效液相色谱中如何提高峰形的对称性？
已经有6人回复
- 求助高效液相色谱-紫外检测器的最低检出限（LOD）大概在什么范围？
已经有13人回复
- 求助高效液相色谱全波长扫描的问题
已经有7人回复
- 高效液相色谱压力问题
已经有19人回复
- 刚做HPLC，请教一下在高效液相图里面mAU是什么具体意思
已经有15人回复
- 求助：五氯酚钠的高效液相色谱的条件？
已经有6人回复
- 【求助】怎么用高效液相色谱测反应的产率啊
已经有9人回复
- 【求助】waters高效液相色谱仪2695
已经有10人回复
- 【求助】高效液相色谱应该至少多长时间运行一次
已经有15人回复
- 【求助】高效液相色谱图 这样子 ，是怎么回事 ？
已经有37人回复
- 【求助】利用高效液相色谱法如何测产率
已经有10人回复
- 【求助】（求助）用高效液相色谱定性时需不需要做稳定性试验
已经有5人回复
- 【求助】反相高效液相色谱问题
已经有9人回复
- 【求助】液相色谱检出限
已经有11人回复
- 【求助】安捷伦高效液相色谱
已经有8人回复
- 【求助】高效液相色谱
已经有26人回复
- 【求助】想知道指纹图谱跟高效液相色谱的最根本区别
已经有11人回复
- 【求助】以水为流动相的高效液相色谱方法
已经有16人回复
jixfeng
木虫 (正式写手)
- 应助: 122 (高中生)
- 金币: 1607.2
- 散金: 147
- 红花: 15
- 帖子: 379
- 在线: 131.4小时
- 虫号: 1246895
- 注册: 2011-03-27
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shan_gao: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-17 14:41:53
感谢参与，应助指数 +1
shan_gao: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-17 14:41:53
|
1.225nm 波长不是很高，再加有离子对试剂，磷酸盐，可以说你的基线本底就比较高，只不过你归零后显示为o附近罢了。所以有任何比流动相响应低的组分出来显示出来的就是倒峰。对照品中为溶剂峰倒峰，样品中2.3min，4min的倒峰应为样品中的组份。 2. 那个不一定是“杂质”，建议更改一下离子对浓度看看.但然也有可能是杂质,显示此体系不适合此杂志，导致严重前沿。 3.查看一下是不是仪器管路有点堵了，95%的水对如今的柱子一般没得问题。45℃也是可以耐受的。是在是堵了的话，反过来小流速冲冲就好。离子对试剂要好好用纯有机相冲冲。 |
2楼2014-09-17 12:15:05
shan_gao
木虫 (小有名气)
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 1938.8
- 散金: 152
- 红花: 11
- 帖子: 299
- 在线: 140.5小时
- 虫号: 1654173
- 注册: 2012-02-29
- 性别: MM
- 专业: 中药鉴定
3楼2014-09-18 16:39:13
4楼2014-09-18 18:20:05
100