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张豆豆!!

新虫 (初入文坛)

[求助] :【植物】+【求助】+幼嫩材料植物茎、根石蜡切片制法~ 已有5人参与

我对3个月的实生苗柽柳的茎和根做石蜡切片~做了很久很久都没有做出来····很苦恼····不知道是不是因为幼嫩植物水分太多?切出来的片子质量很不高~破碎化很严重~请各位高手多多指教~
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stingxt

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by eargle at 2015-05-17 22:07:17
给你点意见:透化剂可以把二甲苯换成正丁醇的,二甲苯味道大不说,毒性也大,正丁醇温和,对植物组织伤害也小的多,特别对幼嫩的组织很好。

,多谢多谢
在低调中前进,在沉默中爆发。
9楼2016-04-19 12:18:35
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查看全部 9 个回答

q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
张豆豆!!: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-10-01 18:55:37
把方法帖出来看看,  切片破碎率很高的话,影响因素有很多,比如脱水不彻底,透明不彻底,刀片质量不好。
2楼2014-09-16 22:54:50
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张豆豆!!

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by q317476148 at 2014-09-16 22:54:50
把方法帖出来看看,  切片破碎率很高的话,影响因素有很多,比如脱水不彻底,透明不彻底,刀片质量不好。

出野外,不好意思才看到,实验步骤
1.        取材   固定 :用FAA 固定液
2.        冲洗 :50%酒精
3.        Day1: 50%酒精(30min)→50%酒精(20min)(2)20min→番红(过夜)
4.        Day2:脱水 :70%(1h或长时间保存)→80%(1h)→95%(1h)→100%  (1h)→100%(45min)。
5.        番红染色和透明 :材料分别加入1/2纯酒精1/2纯二甲苯番红饱和溶液(1h)→纯二甲苯(1 h)→纯二甲苯(45min)。
6. 浸蜡:
        (1)1/2 二甲苯+ 1/2 石蜡(过夜,40 ℃)。50℃缓冲
Day3:
        (2)纯石蜡               (1 h) 56℃
        (3)纯石蜡               (1 h) 57℃
        (4)纯石蜡               (1 h) 58℃
7.        包埋: 8.切片:  
9. 粘片:在载玻片上滴一滴明胶,置40~50度温水中展平,放在烘箱中(40℃)5小时以上。  切片在45℃ 恒温箱中烘干3~ 4h, 即可进行脱蜡等步骤。
Day4:
10.脱蜡:经烘干后的切片入二甲苯(30min)→二甲苯(30min)→1/2 二甲苯十1/2纯酒精(5min)→100%酒精(5min)→95%酒精(5min)→80%(5min)→70%(5min)。   (二甲苯步骤以玻片干净为基准)
染色:番红染液染色1小时
脱水:70%(1min)→80%(1min)→固绿(1-5s)→95%(1min)→100%  (1min)→100%(1min)
透明:1/2 二甲苯十1/2纯酒精(5min)→二甲苯(5min)→二甲苯(2min)
中性树胶封片后镜检。
3楼2014-10-01 18:57:19
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银绳

木虫 (著名写手)

植物菜鸟

【答案】应助回帖


张豆豆!!(q317476148代发): 金币+1, 鼓励积极应助 2015-05-19 09:25:18
我想知道你切出来的片子是什么样子的?如果切出来的片子效果可以,后面的操作就没有问题。
先推荐你看一本书吧,叫《植物显微技术》,非常好的一本书,你可以参照试试。
1、刀片不好,会把片子损坏。刀片不锋利,很容易使切片变得粗糙不完整,有划痕等。
2、浸蜡包埋不彻底,很容易就破碎。因为是根茎类药材,浸蜡可能不容易透彻,切片时就会破碎。你可以延长浸蜡时间试试。

一点小经验,希望可以帮到你。
立马把那本书买了,石蜡切片根本不是问题。
爱好植物,但是是一只菜鸟!
4楼2015-01-27 14:43:40
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