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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 芍药花芽石蜡切片问题！
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颜渊

新虫 (初入文坛)

[求助] 芍药花芽石蜡切片问题！ 已有1人参与

我做的芍药花芽石蜡切片，在浸蜡过夜时用的是二甲苯溶液+牛皮纸带孔小盖子+上面覆盖蜡屑，放入40度恒温箱一晚后，有的小杯子里溶液都没了 花芽外表颜色变深，还有一组花芽全都变得很白，再换到纯蜡里就飘起来了！这是什么原因呢
另外在论坛里看大家说二甲苯倒进去之后白雾茫茫，我的确实会这样，但是我看到的时候也已经晚了没有去重新脱水。除了这一步 还有什么地方可能出现问题呢？
我脱水的时间是1.5h，梯度是50%，70%，85%，95%，100%，100%，然后是1/2alc1/2二甲苯
初到论坛 金币不多，希望大家多多帮忙涅！
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1楼 2012-12-19 10:20:59
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lilywpig

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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4楼2012-12-22 11:46:30
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lilywpig

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
颜渊: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢啦！初到论坛 金币不多请见谅哈！ 2012-12-21 22:32:55
gyfgood: 金币+5, 鼓励优秀的回答。 2012-12-21 22:43:42
飘起来是蜡沒進去吧~~
你加二甲苯之後樣品有變透明嗎?
會不會是前面二甲苯進得不好呀??
二甲苯變白...是脫水沒脫乾淨...然後二甲苯進不去...所以最後蜡進不去吧~
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2楼2012-12-21 17:04:40
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mutant

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我当时做的时候，用的是小青霉素小瓶；等在两次二甲苯透明之后，倒掉瓶中一半的二甲苯，然后加入石蜡碎屑，刚好剩余的二甲苯把碎屑能够浸透，看起来碎屑似溶非溶的状态，然后在37度烘箱过夜，第二天将温度升至56，计时1h后，才换纯蜡，然后开始真正的浸腊。
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6楼2012-12-25 15:44:15
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普通回帖

颜渊

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lilywpig at 2012-12-21 17:04:40
飘起来是蜡沒進去吧~~
你加二甲苯之後樣品有變透明嗎?
會不會是前面二甲苯進得不好呀??
二甲苯變白...是脫水沒脫乾淨...然後二甲苯進不去...所以最後蜡進不去吧~

确实没变透明的。。。但是二甲苯防一晚上就挥发光了 有木有更好的浸蜡过夜办法呢？谢谢回答！
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3楼2012-12-21 22:31:59
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颜渊

新虫 (初入文坛)
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4?: Originally posted by lilywpig at 2012-12-22 11:46:30
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5楼2012-12-23 09:22:32
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zywy12429

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

二甲苯处理时是要用密闭的小瓶子才行，用盒子不漏光挥发才怪。再说二甲苯那么毒，你真的是用生命在做实验啊
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7楼2012-12-31 09:26:17
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大蘑菇

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主，给你提供几个透明时间的建议
1.二甲苯透明过程会导致材料变硬，可以作为判断的标准，在用二甲苯替换乙醇的过程中你可感觉到逐渐材料变硬的过程。
2.我在做的时候一般3次100%二甲苯透明，透明完后会材料会稍透明。二甲苯透明后材料颜色变深，佐证你第一组透明尚可，但是瓶内没有溶液，建议不要浸蜡。
3.第二组内材料变白可能是二甲苯挥发后石蜡附着在材料上面，最好不用。

在浸蜡的过程中蜡屑一旦溶解就需要补上，不是在一个浓度浸一晚上，因为材料在浸蜡的过程中依然是泡在二甲苯中的，二甲苯时间过长会导致材料变脆，到时候切就悲剧了，所以不建议过夜。

有问题再探讨
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8楼2013-01-01 11:30:03
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颜渊

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zywy12429 at 2012-12-31 09:26:17
二甲苯处理时是要用密闭的小瓶子才行，用盒子不漏光挥发才怪。再说二甲苯那么毒，你真的是用生命在做实验啊

这么毒的啊 戴口罩也防不住啊。。有木有用过别的透明剂啊
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9楼2013-01-01 21:30:40
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颜渊

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 大蘑菇 at 2013-01-01 11:30:03
楼主，给你提供几个透明时间的建议
1.二甲苯透明过程会导致材料变硬，可以作为判断的标准，在用二甲苯替换乙醇的过程中你可感觉到逐渐材料变硬的过程。
2.我在做的时候一般3次100%二甲苯透明，透明完后会材料会稍 ...

谢谢啦～！～最近一段时间忙不过来做切片了，两个月后再做
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10楼2013-01-01 21:31:44
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