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：【植物】+【求助】+幼嫩材料植物茎、根石蜡切片制法~ 已有5人参与
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我对3个月的实生苗柽柳的茎和根做石蜡切片~做了很久很久都没有做出来····很苦恼····不知道是不是因为幼嫩植物水分太多？切出来的片子质量很不高~破碎化很严重~请各位高手多多指教~ |
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6楼2015-05-17 22:07:17
q317476148
铁杆木虫 (著名写手)
喵星人
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2楼2014-09-16 22:54:50
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出野外，不好意思才看到，实验步骤 1. 取材 固定 ：用FAA 固定液 2. 冲洗 ：50%酒精 3. Day1: 50%酒精（30min）→50%酒精(20min)（2）20min→番红（过夜） 4. Day2：脱水 ：70%（1h或长时间保存）→80%（1h）→95%（1h）→100% （1h）→100%（45min）。 5. 番红染色和透明 ：材料分别加入1/2纯酒精1/2纯二甲苯番红饱和溶液(1h)→纯二甲苯（1 h）→纯二甲苯（45min）。 6． 浸蜡： （1）1/2 二甲苯+ 1/2 石蜡(过夜，40 ℃)。50℃缓冲 Day3： （2）纯石蜡 （1 h） 56℃ （3）纯石蜡 （1 h） 57℃ （4）纯石蜡 （1 h） 58℃ 7． 包埋： 8.切片： 9． 粘片：在载玻片上滴一滴明胶，置40~50度温水中展平，放在烘箱中（40℃）5小时以上。 切片在45℃ 恒温箱中烘干3～ 4h, 即可进行脱蜡等步骤。 Day4： 10．脱蜡：经烘干后的切片入二甲苯（30min）→二甲苯（30min）→1/2 二甲苯十1/2纯酒精（5min）→100%酒精（5min）→95％酒精（5min）→80%（5min）→70%（5min）。 （二甲苯步骤以玻片干净为基准） 染色：番红染液染色1小时 脱水：70%（1min）→80%（1min）→固绿（1-5s）→95%（1min）→100% （1min）→100%（1min） 透明：1/2 二甲苯十1/2纯酒精（5min）→二甲苯（5min）→二甲苯（2min） 中性树胶封片后镜检。 |
3楼2014-10-01 18:57:19
银绳
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4楼2015-01-27 14:43:40
10