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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 6%的SDS-PAGE变性电泳进行DNA的检测
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happy老冀

金虫 (小有名气)

[求助] 6%的SDS-PAGE变性电泳进行DNA的检测 已有1人参与

我最近想要跑一下SDS-PAGE变性胶，分离DNA，我的DNA是6.5kb，但末端可能连接有一分子的蛋白质，大小不清楚，但猜测大约是20KDa，用6%的变性蛋白胶可以出孔吗？
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1楼 2014-09-01 21:53:24
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA胶为什么要SDS?
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-09-02 00:49:33
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happy老冀

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-09-02 00:49:33
DNA胶为什么要SDS?

那个DNA末端共价连接着蛋白质所以要用SDS啊
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3楼2014-09-02 13:31:34
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
★ ★
happy老冀(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-04 19:40:50
引用回帖:
3楼: Originally posted by happy老冀 at 2014-09-02 13:31:34
那个DNA末端共价连接着蛋白质所以要用SDS啊...

不用SDS应该就能跑得出胶孔。DNA带大量负电荷，蛋白带的电荷比起来非常少，所以整个分子肯定是带负电的，但是跑得速度会比较慢。
SDS会使蛋白变性。所以如果DNA和蛋白是非共价键连接的，用了SDS反而会使蛋白失去和DNA的结合能力。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2014-09-03 23:10:22
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happy老冀

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-09-03 23:10:22
不用SDS应该就能跑得出胶孔。DNA带大量负电荷，蛋白带的电荷比起来非常少，所以整个分子肯定是带负电的，但是跑得速度会比较慢。
SDS会使蛋白变性。所以如果DNA和蛋白是非共价键连接的，用了SDS反而会使蛋白失去和 ...

试了一下，还是没有出孔，打算用其他方法试试
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5楼2014-09-06 08:40:06
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