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云上随风

金虫 (小有名气)

[求助] 植物过氧化氢酶CAT的测定遇到的问题 已有4人参与

我测的是植物叶子中的CAT,提取完后,颜色比较深,用比色法在240nm下测定CAT时,紫外分光光度计数值不稳定,正常是需要测40s内比色值的下降,但是我的读数总是不停上升和下降,数值跳动厉害,做着好闹心,有没有碰到同样问题的,有研究过的能不能帮帮我,会不会是反应液时间太久了,还是溶液颜色深干扰
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taojia7560

木虫 (正式写手)

你测的是什么叶片?叶片是不是有点发红?
平凡
2楼2014-09-01 22:53:59
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云上随风

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by taojia7560 at 2014-09-01 22:53:59
你测的是什么叶片?叶片是不是有点发红?

普通的植物绿色叶片,没有红色的,我看到其他的帖子有好多这样的,就是比色值不降反升,后来我没办法了,就观察了一分钟,等数值稳定下降后再测,其中原因有的说是双氧水时间久,得换新的,我的溶液冰箱放半月,不知道还能不能继续用
3楼2014-09-02 09:50:14
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taojia7560

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
云上随风: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-09-04 15:19:39
引用回帖:
3楼: Originally posted by 云上随风 at 2014-09-02 09:50:14
普通的植物绿色叶片,没有红色的,我看到其他的帖子有好多这样的,就是比色值不降反升,后来我没办法了,就观察了一分钟,等数值稳定下降后再测,其中原因有的说是双氧水时间久,得换新的,我的溶液冰箱放半月,不 ...

有些材料是因为含有花青素(270-290),会有干扰,比色值不降反升。可以换用其他方法进行测定
平凡
4楼2014-09-03 15:31:37
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云上随风

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by taojia7560 at 2014-09-03 15:31:37
有些材料是因为含有花青素(270-290),会有干扰,比色值不降反升。可以换用其他方法进行测定...

回答很专业啊!可能是吧,但是其他的方法没有比色法简单吧,有没有把干扰物除去的东西,或者不除去 也能给出准确数据的操作?你们是碰到过这种问题没,有解决方法么
5楼2014-09-04 15:22:11
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taojia7560

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不用去除干扰物质。你用高锰酸钾滴定法,我们这边有个师姐正这么做着

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
平凡
6楼2014-09-04 21:41:36
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guoyu0731

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
云上随风: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-09-05 11:52:01
引用回帖:
3楼: Originally posted by 云上随风 at 2014-09-02 09:50:14
普通的植物绿色叶片,没有红色的,我看到其他的帖子有好多这样的,就是比色值不降反升,后来我没办法了,就观察了一分钟,等数值稳定下降后再测,其中原因有的说是双氧水时间久,得换新的,我的溶液冰箱放半月,不 ...

避光测的吗?可能是双氧水的问题,而且我测的时候是测了3分钟,间隔30s第一次,结果还可以,还有我认为双氧水的量也得合适才好
7楼2014-09-04 22:34:22
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diguoxueye

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by guoyu0731 at 2014-09-04 22:34:22
避光测的吗?可能是双氧水的问题,而且我测的时候是测了3分钟,间隔30s第一次,结果还可以,还有我认为双氧水的量也得合适才好...

你好,我也遇到了这种问题,我想问问,如果出现这种问题,并且双氧水也没有问题的话,那是需要调整双氧水的浓度和用量吗?
向着幸福的终点站前进,为了爱与世界和平,还是去跳楼吧
8楼2014-10-02 20:56:58
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甚玩意儿

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
云上随风: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-05-02 15:59:07
我的也是这种情况,我测得植物叶片红的,数值一直不稳定,还经常不降反升,我试了调整酶液浓度、过氧化氢浓度、加各种稳定剂还是没有效果,虽然没成功,但我可以肯定和过氧化氢不新鲜什么的(试剂方面)没有太大关系!
9楼2015-05-01 22:38:46
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nijiaoyun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主你现在测出来了吗?我最近在测葡萄过氧化氢酶,跟你的问题一样一样的。。甚至用标品酶测得吸光值也不稳定,壮阳水也是新买的,我实在不知道怎么弄了,
10楼2015-08-08 14:41:05
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