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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 作物 » 植物过氧化氢酶CAT的测定遇到的问题
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云上随风

金虫 (小有名气)

[求助] 植物过氧化氢酶CAT的测定遇到的问题 已有4人参与

我测的是植物叶子中的CAT，提取完后，颜色比较深，用比色法在240nm下测定CAT时，紫外分光光度计数值不稳定，正常是需要测40s内比色值的下降，但是我的读数总是不停上升和下降，数值跳动厉害，做着好闹心，有没有碰到同样问题的，有研究过的能不能帮帮我，会不会是反应液时间太久了，还是溶液颜色深干扰
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1楼 2014-09-01 21:24:48
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taojia7560

木虫 (正式写手)
你测的是什么叶片？叶片是不是有点发红？
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平凡
2楼2014-09-01 22:53:59
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云上随风

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by taojia7560 at 2014-09-01 22:53:59
你测的是什么叶片？叶片是不是有点发红？

普通的植物绿色叶片，没有红色的，我看到其他的帖子有好多这样的，就是比色值不降反升，后来我没办法了，就观察了一分钟，等数值稳定下降后再测，其中原因有的说是双氧水时间久，得换新的，我的溶液冰箱放半月，不知道还能不能继续用
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3楼2014-09-02 09:50:14
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taojia7560

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
云上随风: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-09-04 15:19:39
引用回帖:
3楼: Originally posted by 云上随风 at 2014-09-02 09:50:14
普通的植物绿色叶片，没有红色的，我看到其他的帖子有好多这样的，就是比色值不降反升，后来我没办法了，就观察了一分钟，等数值稳定下降后再测，其中原因有的说是双氧水时间久，得换新的，我的溶液冰箱放半月，不 ...

有些材料是因为含有花青素（270-290），会有干扰，比色值不降反升。可以换用其他方法进行测定
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平凡
4楼2014-09-03 15:31:37
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云上随风

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by taojia7560 at 2014-09-03 15:31:37
有些材料是因为含有花青素（270-290），会有干扰，比色值不降反升。可以换用其他方法进行测定...

回答很专业啊！可能是吧，但是其他的方法没有比色法简单吧，有没有把干扰物除去的东西，或者不除去 也能给出准确数据的操作？你们是碰到过这种问题没，有解决方法么
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5楼2014-09-04 15:22:11
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taojia7560

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不用去除干扰物质。你用高锰酸钾滴定法，我们这边有个师姐正这么做着

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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平凡
6楼2014-09-04 21:41:36
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guoyu0731

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
云上随风: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-09-05 11:52:01
引用回帖:
3楼: Originally posted by 云上随风 at 2014-09-02 09:50:14
普通的植物绿色叶片，没有红色的，我看到其他的帖子有好多这样的，就是比色值不降反升，后来我没办法了，就观察了一分钟，等数值稳定下降后再测，其中原因有的说是双氧水时间久，得换新的，我的溶液冰箱放半月，不 ...

避光测的吗？可能是双氧水的问题，而且我测的时候是测了3分钟，间隔30s第一次，结果还可以，还有我认为双氧水的量也得合适才好
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7楼2014-09-04 22:34:22
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diguoxueye

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by guoyu0731 at 2014-09-04 22:34:22
避光测的吗？可能是双氧水的问题，而且我测的时候是测了3分钟，间隔30s第一次，结果还可以，还有我认为双氧水的量也得合适才好...

你好，我也遇到了这种问题，我想问问，如果出现这种问题，并且双氧水也没有问题的话，那是需要调整双氧水的浓度和用量吗？
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向着幸福的终点站前进，为了爱与世界和平，还是去跳楼吧
8楼2014-10-02 20:56:58
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甚玩意儿

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
云上随风: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-05-02 15:59:07
我的也是这种情况，我测得植物叶片红的，数值一直不稳定，还经常不降反升，我试了调整酶液浓度、过氧化氢浓度、加各种稳定剂还是没有效果，虽然没成功，但我可以肯定和过氧化氢不新鲜什么的（试剂方面）没有太大关系！
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9楼2015-05-01 22:38:46
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nijiaoyun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主你现在测出来了吗？我最近在测葡萄过氧化氢酶，跟你的问题一样一样的。。甚至用标品酶测得吸光值也不稳定，壮阳水也是新买的，我实在不知道怎么弄了，
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10楼2015-08-08 14:41:05
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