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小伟少

新虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱分析两种化合物时分不开,具体情况如下,请大家给点意见 已有7人参与

分析两种化合物   流动相为甲醇和水(四丁基溴化铵1g/L,磷酸二氢钾2g/L,用磷酸调节PH为4)。在色谱条件为甲醇:水=35:65  流速为0.8   时谱图为图1这是两种化合物我分别做了检测两者位置重合。    甲醇:水=25:75     流速为1时谱图为图2。      甲醇:水=45:55  流速为1时  谱图为图3。这两次由于时间问题我没有对单独化合物做检测。不知道这几个图大家看完之后能不能给我一些建议,下部应该怎么做。还有明明是两种化合物不同的比例下怎么会出现这么多的峰。 问题可能有点多,大家有时间的话,能告诉我哪个问题都行。先谢谢啦!!!

液相色谱分析两种化合物时分不开,具体情况如下,请大家给点意见
图 1.jpg


液相色谱分析两种化合物时分不开,具体情况如下,请大家给点意见-1
图 2.jpg


液相色谱分析两种化合物时分不开,具体情况如下,请大家给点意见-2
图 3.jpg
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晓风眷月

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主的样品浓度怎么三次的都不一样啊,一个检测在3000,一个在600最后一个在4000,建议把浓度都统一调在一个合适的浓度,吸光度在1000~2000就差不多了,然后就是梯度洗脱,从低到高,先从0%甲醇开始,一直到100%的甲醇吧,摸条件的时候,走梯度的时间尽可能长些,让梯度走的慢些,防止基线飘得太高,不好分析。
感性大于理性的理科人
8楼2014-08-28 08:44:04
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最直接的就是更换色谱柱,如果没有此条件,可以试试离子对试剂
2楼2014-08-27 17:28:37
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mingge

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先进一针空白,了解下出峰这么多,这么杂是不是流动相或者其他原因导致的。
在单独进一下两个化合物,看看出峰位置,确认一下混合后哪个是你需要的东西。
再走一个梯度,可以从甲醇5%走到95%看看结果如何,了解下最佳的流动相比例在什么位置,再做一下微调。
后面的优化方向,视具体结果而定。
Q1454596160
3楼2014-08-27 17:40:41
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先,利用流动相冲洗仪器,赶出仪器内(包含柱子)的杂物,其次,变化流动相配比,甲醇含量不能过大,从图上看超过45%后出峰时间已经很靠前了,会带有很多干扰因素,调配流动相比例时甲醇含量最好不要超过45%。若还是分不开,需要查文献换流动相,或者认为分峰(根据纯物质出峰时间分峰)。
加油!
4楼2014-08-27 19:08:06
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